2004 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝子KOトキソプラズマ原虫作製法の確立と弱毒生ワクチン開発への応用
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14360172
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| Research Institution | Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine |
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Principal Investigator |
玄 学南 国立大学法人帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 助教授 (10292096)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
横山 直明 国立大学法人帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 助教授 (80301802)
井上 昇 国立大学法人帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 助教授 (10271751)
田仲 哲也 国立大学法人北海道大学, 農学部, 助手 (00322842)
岩田 晃 (財)日本生物科学研究所, 主任研究員 (70193745)
高島 康弘 国立大学法人岐阜大学, 応用生物科学部, 助教授 (20333552)
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| Keywords | トキソプラズマ / ネオスポラ / クリプトスポリジウム / TgSAG1 / TgSAG2 / NcSAG1 / NcSRS2 / CpP23 |
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| Research Abstract |
本研究では迅速で簡便な遺伝子KOトキソプラズマ原虫の作製法を開発し、それにより本原虫の病原性因子の同定を行い、最終的には病原性遺伝子をKOした有効な弱毒生ワクチンの開発を目指して企画した。本研究は4年間の研究期間内に以下のような手順で実施していく。1)トキソプラズマ原虫のタキゾイト、シスト及びオーシストなど異なる生活環の虫体のcDNAライブラリーを作成する。2)各生活環でキー役割を果たす主要遺伝子を同定する。3)各主要遺伝子のKO原虫を作製する。4)各遺伝子KO原虫のマウス及びネコにおけるシスト或いはオーシスト形成能及び病原性を調べる。5)病原性遺伝子KO原虫(弱毒化された原虫)のマウス及びネコにおける強毒原虫の感染に対する防御免疫誘導能を調べる。6)他の病原体の抗原遺伝子を発現する価組換えワクチン(トキソプラズマ病と他の病原体の感染症を同時に予防できる)の作製と応用を検討する。本年度に得られた主な成績は以下の通りである。1)ネオスポラ原虫の主要抗原NcSAG1とNcSRS2を発現する組換えトキソプラズマ原虫を作製した。2)トキソプラズマ原虫の主要抗原TgSAG1とTgSAG2を発現する組換えネオスポラ原虫を作製した。3)クリプトスポリジウム原虫の主要抗原CpP23を発現する組換えトキソプラズマ原虫を構築した。4)クリプトスポリジウム原虫の主要抗原P23を発現する組換えネオスポラ原虫を構築した。5)上記組換えトキソプラズマ或いはネオスポラ原虫により発現された抗原タンパク質はいずれも天然型抗原に類似していることが確認された。
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