2002 Fiscal Year Annual Research Report

誘導型AmpCのシグナルとなるムロペプタイド伝達に関与する遺伝子解析

Research Project

Project/Area Number	14370096
Research Institution	Kitasato University
Principal Investigator	井上松久北里大学, 医学部, 教授 (10008336)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	北里英郎北里大学, 医学部, 講師 (90195256) 岡本了一北里大学, 医学部, 講師 (30224083)
Keywords	class C型β-lactamase / セフェムセフェム系薬耐性 / シグナル / 誘導型酵素 / AmpG / E. cloacae
Research Abstract	1.1)先にEscherichia coliK12pKU403から分離した3株のampR変異セフェム系薬高度耐性株は、1種のシグナル伝達に関与するAmpG株保有株に比べてAmpG欠損株でもclass C型酵素が低下するものの十分量産生することが判った。また、自然界から分離したclass C型酵素を全く生産しないセファロスポリン系薬感受性E. cloacaeにこの変異型ampR DNA断片を共存させると誘導型class C型酵素活性が著しく増えたことから、野生型AmpRと変異型AmpRが共存すると酵素活性が増加した。この結果は、変異型AmpRがシグナル非存在下でもclass C型酵素を産生し得ることを示すものと判断された(投稿準備中)。 2)臨床分離Enterobacter cloacae ampD変異株KU3(class C型酵素活性は約30u/mg protein)からセフェム系薬超感受性変異株KU69を分離した。KU69のclass C型酵素量は0.05u/mg proteinであり、ampC-ampR遺伝子に何らかの変異も認められなかった。そこで、KU69は、E. cloacaeのampG全領域を含むプラスミドpGKS171-3を形質転換させたときにのみその酵素活性が約30u/mg proteinに復帰した。この結果からKU69はampG変異と結論され、ampG遺伝子についてprimer workingによりDNA塩基配列を行った。その結果、KU69のAmpGの132番目のトリプトファン(TGG)が点変異によって終止コドン(TAG)点変異であった。そこで、132番目のアミノ酸領域のペプチド抗体を作製し、KU3とKU69をレーザー顕微鏡で観察し、細菌内のAmpG局在を観察したところ、KU69から何らの反応が検出できず、AmpGは、耐性化を防ぐと一つの方法となり得る可能性が考えられた(登校準備中)。 2.同様にStaphylococcus aureusのβ-lactamaseやmecA遺伝子についても染色体性遺伝子による調節を受けていることが判り、本テーマとの関連性も含めて次年度から検討する予定。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Matsuoka, M ほか: "A new macrolide resistant gene ermF that encoded by plasmid in Staphy lococcus aureus"Antimicrob Agents Chemother. 46. 154-159 (2002)
[Publications] Ida, T ほか: "Antagonism between AGs and β-lactams in a MRSA isolate involves induction of an aminoglycoside-modifying enzyme"Antimicrob Agents Chemother. 46. 1516-1522 (2002)
[Publications] Hosaka, Y ほか: "Characterization of pKU701, a 2.5kb plasmid, in a Japanese Helicobacter pyrori isolate"J. Antibiotics. 55. 495-498 (2002)
[Publications] Xiong, Z ほか: "Investigation of extended-spectrum beta-lactamase in Klebsiella pneumooniae and Escherichia coli"Diag Microbiol Infect Dis. 44. 195-200 (2002)
[Publications] Nakano, R ほか: "Characterization of a novel plasmid-mediated AmpC β-lactamase genes with an ampR gene originated from Citrobacter freundii"42^<nd>ICAAC Abstracts. 1-1856 (2002)
[Publications] 中野竜一ほか: "臨床分離大腸菌から検出されたC, feundii由来セフェム耐性プラスミドニコードされたampR-ampCの調節機構の解析"日本化学療法学会雑誌. 50S-A. 203 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

誘導型AmpCのシグナルとなるムロペプタイド伝達に関与する遺伝子解析

Principal Investigator

井上 松久 北里大学, 医学部, 教授 (10008336)

Research Products

[Publications] Matsuoka, M ほか: "A new macrolide resistant gene ermF that encoded by plasmid in Staphy lococcus aureus"Antimicrob Agents Chemother. 46. 154-159 (2002)

[Publications] Ida, T ほか: "Antagonism between AGs and β-lactams in a MRSA isolate involves induction of an aminoglycoside-modifying enzyme"Antimicrob Agents Chemother. 46. 1516-1522 (2002)

[Publications] Hosaka, Y ほか: "Characterization of pKU701, a 2.5kb plasmid, in a Japanese Helicobacter pyrori isolate"J. Antibiotics. 55. 495-498 (2002)

[Publications] Xiong, Z ほか: "Investigation of extended-spectrum beta-lactamase in Klebsiella pneumooniae and Escherichia coli"Diag Microbiol Infect Dis. 44. 195-200 (2002)

[Publications] Nakano, R ほか: "Characterization of a novel plasmid-mediated AmpC β-lactamase genes with an ampR gene originated from Citrobacter freundii"42^<nd>ICAAC Abstracts. 1-1856 (2002)

[Publications] 中野竜一 ほか: "臨床分離大腸菌から検出されたC, feundii由来セフェム耐性プラスミドニコードされたampR-ampCの調節機構の解析"日本化学療法学会雑誌. 50S-A. 203 (2002)

井上松久北里大学, 医学部, 教授 (10008336)

[Publications] 中野竜一ほか: "臨床分離大腸菌から検出されたC, feundii由来セフェム耐性プラスミドニコードされたampR-ampCの調節機構の解析"日本化学療法学会雑誌. 50S-A. 203 (2002)