非ウイルスベクター遺伝子治療による脳保護療法および脳血流再建法

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14370432
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 齋藤 洋一 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (20252661)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 恵口 豊 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (20243206) ; 吉峰 俊樹 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (00201046) ; 加藤 天美 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (00233776) ; 小川 智 金沢大学, 医学系研究科, 教授 (90283746)
• Keywords: Gene therapy / Brain protection / HGF / Liposome

Research Abstract

1)アカゲザルの大槽内に数回にわたり、レポータージーンであるLacZまたはGFP-ODNまたはDsRedをHVJ-Eに封入して遺伝子導入し、最終遺伝子導入から1週間後に処分し還流固定した。脳を取り出し、50ミクロンの凍結切片を作成し、脳内とくも膜下腔の動脈壁へのレポータージーンの導入を検討したが、自家蛍光が強かったり、非特異的反応が強かったりで、有意な遺伝子導入をどのレポータージーンにおいても、脳内、血管壁に観察できなかった。非ウイルスベクターであるHVJ-Eの神経組織および血管壁への進達度が不十分であるのか、レポータージーンの問題であるのかを現在、検討中である。
2)ラットの顔面神経上顎枝と下顎枝を切断し、8mmのギャップを作成し、シリコンチューブで橋渡しし、チューブ内にアルブミン封入した対照群と、HGFタンパクを封入した場合、HGFプラスミドを封入した場合での神経再生の速度、再生有髄線維の数、顔面神経核の神経細胞数の検討を行っている。今後、GDNF封入シリコンチューブとの比較も行う予定である。
3)ラット脳内(線条体)にコラゲナーゼを微量注入することで脳内出血モデルを作製した。今後、血腫周囲の脳実質内神経細胞死をTUNEL法で検討し、血腫腔内にHGFタンパクまたはHGFプラスミドを注入することで血腫周囲の神経細胞死の評価、および組織像の検討を行う予定である。また、ラットの行動を観察し、麻痺の程度を検討する。

Research Products

• [Publications] Saitoh Y, et al.: "Radiosurgery for acromegaly"Recent Research Developments in Endocrinology. 3. 1-10 (2002)
• [Publications] Saitoh Y, et al.: "Gene therapy for ischemic brain disease"The Cur Gene. 3. 49-58 (2003)
• [Publications] Kato A, et al.: "Application of SAM virtual sensor method for localization of origins and propagation of epileptic discharges in refractory frontal lobe epilepsy"BIOMAG 2002. 254-256 (2002)
• [Publications] Hirata M, et al.: "Determination of language dominance using synthetic aperture magsetometry : comparison with Wada test"BIOMAG 2002. 350-352 (2002)
• [Publications] 齋藤洋一 他: "他科医の指摘により受診,手術により完治した例"アクロン. 1. 6-7 (2002)
• [Publications] 齋藤洋一 他: "Prolactinomaの治療方針-170例の経蝶型骨洞手術結果からの検討"日本内分泌学会雑誌. 78. 20-22 (2002)