2002 Fiscal Year Annual Research Report

網膜性色素変性症RP9の原因遺伝子PAP-1とその関連遺伝子群の機能解析

Research Project

Project/Area Number	14370551
Research Institution	Hokkaido University
Principal Investigator	有賀早苗北海道大学, 医療技術短期大学部, 教授 (90184283)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	平敬宏北海道大学, 大学院・薬学研究科, 助教授 (70197036) 有賀寛芳北海道大学, 大学院・医学研究科, 教授 (20143505)
Keywords	PAP-1 / c-MYc / RP9 / 網膜性色素変性症 / スプライシング / Pim-1 / リン酸化 / 網膜
Research Abstract	1.PAP-1のSplicing因子としての機能とRP9変異 PAP-1は癌遺伝子産物Pim-1の結合タンパク質として本研究室で単離・同定した新規タンパク質である.また,そのアミノ酸変異は網膜性色素変性症RP9の原因であると報告されている.PAP-1の機能解析のためにPAP-1結合タンパク質をスクリーニングしたところ,splicing因子SC35,U2AF35が同定され,これらは核内でドット状に共局在することが判明した.In vivo, in vitro splicing assayを行なったところ,PAP-1はそのリン酸化状態に依存してAd2 Ela geneのスプライシングパターンを変更させることからsplicing因子であることが明かとなった.RP9患者に見られる2種類のPAP-1変異の内,D170G変異PAP-1は野生型に比較してリン酸化の程度が低く,かつsplicing因子としての機能を失っていた.以上より,PAP-1は網膜で発現する遺伝子のsplicing調節因子として機能し,RP9患者では正常なsplicingが起きないために異常なタンパク質が産生されることが病因と考えられた. 2.PAP-1結合タンパク質PAPA-1 PAP-1結合タンパク質として単離・同定された新規タンパク質PAPA-1は核小体に存在し,Pim-1-PAP-1機能を調節し,細胞周期を負に制御することが明らかとなった.更に,PAPA-1結合因子としてc-Myc結合タンパク質であるMiz-1を同定し,Pim-1→cMyc経路がつながった. 3.PAP-1ノックアウトマウスの作成 PAP-1の固体レベルでの機能解析を自的としてPAP-1ノックアウトマウスの作成を行なっている.現在までにマウスPAP-1ゲノム遺伝子単離,ターゲツトベクターを作成,組替ES細胞のスクリーニングが完了した.

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Yukitake et al.: "AAT-1, a novel testis-specific AMY-1-binding protein, forms a quarterly complex between AMY-1, A-kinase anchor protein 84 and a regulatory subunit of cAMP-dependent kinase, and is phosphorylated by its kinase"J. Biol. Chem.. 277. 45480-45492 (2002)
[Publications] Furusawa et al.: "AMY-1 interacts with S-AKAP84 and AKAP95 in the cytoplasm and the nucleus, respectively, and inhibits cAMP-dependent protein kinase activity by preventing binding of its catalytic subunit to AKAP complex"J. Biol. Chem.. 277. 50885-50892 (2002)
[Publications] Yukitake et al.: "AMAP-1, a novel testis-specific AMY-1-binding protein, is differentially expressed during the course of spermatogenesis"Biochim. Biophyta Acta. 1577. 126-132 (2002)
[Publications] Okada et al.: "DJ-1, a target protein for an endocrine disrupter, participates in the fertilization in mice"Biol. Pharm. Bull.. 25. 853-856 (2002)
[Publications] Ariga et al.: "DJ-1, a target protein of androgen-related endocrine disrupters (minireview)"Environmental Sci.. 10. 13-21 (2003)
[Publications] Furusawa et al.: "Molecular cloning of the mouse AMY-1 gene and identification of the synergistic activation of the AMY-1 promoter by GATA-1 and Sp1"Genomics. 81. 221-233 (2003)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

網膜性色素変性症RP9の原因遺伝子PAP-1とその関連遺伝子群の機能解析

Principal Investigator

有賀 早苗 北海道大学, 医療技術短期大学部, 教授 (90184283)

Research Products

[Publications] Yukitake et al.: "AAT-1, a novel testis-specific AMY-1-binding protein, forms a quarterly complex between AMY-1, A-kinase anchor protein 84 and a regulatory subunit of cAMP-dependent kinase, and is phosphorylated by its kinase"J. Biol. Chem.. 277. 45480-45492 (2002)

[Publications] Furusawa et al.: "AMY-1 interacts with S-AKAP84 and AKAP95 in the cytoplasm and the nucleus, respectively, and inhibits cAMP-dependent protein kinase activity by preventing binding of its catalytic subunit to AKAP complex"J. Biol. Chem.. 277. 50885-50892 (2002)

[Publications] Yukitake et al.: "AMAP-1, a novel testis-specific AMY-1-binding protein, is differentially expressed during the course of spermatogenesis"Biochim. Biophyta Acta. 1577. 126-132 (2002)

[Publications] Okada et al.: "DJ-1, a target protein for an endocrine disrupter, participates in the fertilization in mice"Biol. Pharm. Bull.. 25. 853-856 (2002)

[Publications] Ariga et al.: "DJ-1, a target protein of androgen-related endocrine disrupters (minireview)"Environmental Sci.. 10. 13-21 (2003)

[Publications] Furusawa et al.: "Molecular cloning of the mouse AMY-1 gene and identification of the synergistic activation of the AMY-1 promoter by GATA-1 and Sp1"Genomics. 81. 221-233 (2003)

有賀早苗北海道大学, 医療技術短期大学部, 教授 (90184283)