2003 Fiscal Year Annual Research Report

網膜性色素変性症RP9の原因遺伝子PAP-1とその関連遺伝子群の機能解析

Research Project

Project/Area Number	14370551
Research Institution	HOKKAIDO UNIVERSITY
Principal Investigator	有賀早苗北海道大学, 大学院・農学研究科, 教授 (90184283)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	平敬宏北海道大学, 大学院・薬学研究科, 助教授 (70197036) 有賀寛芳北海道大学, 大学院・薬学研究科, 教授 (20143505)
Keywords	PAP-1 / c-Myc / RP9 / 網膜性色素変性症 / スプライシング / Pim-1 / リン酸化 / 網膜
Research Abstract	1.PAP-1のsplicing因子としての機能とRP9変異 PAP-1は癌遣伝子産物Pim-1の結合タンパク質として本研究室で単離・同定した新規タンパク質である。また、そのアミノ酸変異は網膜性色素変性症RP9の原因であると報告されている。PAP-1の機能解析のためにPAP-1結合タンパク質をスクリーニングしたところ、splicing因子SC35,U2AF35が同定され、これらは核内でドット状に共局在することが判明した。In vivo, in vitro splicing assayを行なったところ、PAP-1はそのリン酸化状態に依存してAd2 E1a geneのスプライシングパターンを変更させることからsplicing因子であることが明かとなった。この結果はin vitro再構成系で更に確認された。RP9患者に見られる2種類のPAP-1変異の内、D170G変異PAP-1は野生型に比較してリン酸化の程度が低く、かつsplicing因子としての機能を失っていた。以上より,PAP-1は網膜で発現する遺伝子のsplicing調節因子として機能し、RP9患者では正常なsplicingが起きないために異常なタンパク質が産生されることが病因と考えられた。 2.PAP-1結合タンパク質PAPA-1 PAP-1結合タンパク質として単離・同定された新規タンパク質PAPA-1は核小体に存在し、Pim-1-PAP-1機能を調節し、細胞周期を負に制御することが明らかとなった。更に,PAPA-1結合因子としてc-Myc結合タンパク質であるMiz-1を同定した。更に、PAPA-1も直接c-Mycに結合することが判明し、3者は拮抗的にc-Mycに結合してc-Myc機能調節を行っていることが判明した。事実、PAPA-1はc-Mycを正に、Miz-1はc-Mycの転写能を負に制御していた。 3.PAP-1ノックアウトマウスの作成 PAP-1の固体レベルでの機能解析を目的としてPAP-1ノックアウトマウスの作成を行なっている。現在までにマウスPAP-1ゲノム遺伝子単離,ターゲットベクターを作成,組替ES細胞のスクリーニングが完了した。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Ariga et al.: "DJ-1, a target protein of androgen-related endocrine disrupters"Environmental Sci.. 10. 13-21 (2003)
[Publications] Furusawa et al.: "Molecular cloning of the mouse AMY-1 gene and identification of the synergistic activation of the AMY-1 promoter by GATA-1 and Sp1"Genomics. 81. 221-233 (2003)
[Publications] Niki et al.: "DJBP, a novel DJ-1-binding protein, negatively regulates the androgen receptor by recruiting histone deacetylase complex, and DJ-1 antagonizes this inhibition by abrogation of this complex"Mol.Cancer Res.. 1. 247-261 (2003)
[Publications] Kuroda et al.: "The actin-binding domain of Slac2-a/melanophilin is required for melanosome distribution in melanocyte"Mol.Cell.Biol.. 23. 5245-5255 (2003)
[Publications] Honbou et al.: "The Crystal structure of DJ-1, a protein related to male fertility and Parkinson's disease"J.Biol.Chem. 278. 31380-31384 (2003)
[Publications] Taira et al.: "DJ-1 plays a role in anti-oxidative stress to prevent cell death"EMBO Rep.. 5. 213-218 (2004)
[Publications] 有賀寛芳: "生物薬科学実験講座6・細胞の増殖と成長因子(1)細胞周期の解析"廣川書店. 5 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

網膜性色素変性症RP9の原因遺伝子PAP-1とその関連遺伝子群の機能解析

Principal Investigator

有賀 早苗 北海道大学, 大学院・農学研究科, 教授 (90184283)

Research Products

[Publications] Ariga et al.: "DJ-1, a target protein of androgen-related endocrine disrupters"Environmental Sci.. 10. 13-21 (2003)

[Publications] Furusawa et al.: "Molecular cloning of the mouse AMY-1 gene and identification of the synergistic activation of the AMY-1 promoter by GATA-1 and Sp1"Genomics. 81. 221-233 (2003)

[Publications] Niki et al.: "DJBP, a novel DJ-1-binding protein, negatively regulates the androgen receptor by recruiting histone deacetylase complex, and DJ-1 antagonizes this inhibition by abrogation of this complex"Mol.Cancer Res.. 1. 247-261 (2003)

[Publications] Kuroda et al.: "The actin-binding domain of Slac2-a/melanophilin is required for melanosome distribution in melanocyte"Mol.Cell.Biol.. 23. 5245-5255 (2003)

[Publications] Honbou et al.: "The Crystal structure of DJ-1, a protein related to male fertility and Parkinson's disease"J.Biol.Chem. 278. 31380-31384 (2003)

[Publications] Taira et al.: "DJ-1 plays a role in anti-oxidative stress to prevent cell death"EMBO Rep.. 5. 213-218 (2004)

[Publications] 有賀寛芳: "生物薬科学実験講座6・細胞の増殖と成長因子(1)細胞周期の解析"廣川書店. 5 (2003)

有賀早苗北海道大学, 大学院・農学研究科, 教授 (90184283)