c-Mycとその結合タンパク質による細胞周期調節機構と細胞癌化

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14370736
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 有賀 寛芳 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 教授 (20143505)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 有賀 早苗 北海道大学, 医療技術短期大学部, 教授 (90184283) ; 北浦 広剛 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 助手 (10281817) ; 平 敬宏 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 助教授 (70197036)
• Keywords: c-Myc / MM-1 / AMY-1 / 癌抑制遺伝子 / AKAP / 精子形成 / c-fms / PKA

Research Abstract

本研究室で同定した新規c-Myc結合タンパク質MM-1,AMY-1に関して以下の新知見をえた。
1.MM-1
c-Mycの転写活性化/抑制化ドメインに結合し,c-Myc転写能を抑制する新規タンパク質MM-1は,白血病,リンパ腫,舌癌などに関与する新規癌抑制遺伝子と考えられる.MM-1は,c-Myc N末にTIF1βを介する新規な転写抑制経路を仲介し,更に(Cul II-Skp2-Elongin B)をc-Mycにリクルートしc-Myc分解を司る因子であることが明らかとなった.また,c-Myc-MM-1経路のc-Myc転写抑制遺伝子として癌遺伝子c-fmsを同定することができた.更に,MM-1はヒト染色体12番由来のスプライシングの違いによるMM-1α,β,δ,γとN末13アミノ酸が14番染色体由来の融合MM-1が存在し,細胞内の局在が異なっていた.以上より、MM-1よるc-Mycの転写抑制と分解の分子機構が明らかとなった.
2.AMY-1
c-Mycの転写活性化に結合し,c-Myc転写能を抑制する新規タンパク質AMY-1の結合タンパク質としてS-AKAP84/AKAP149,AKAP95を同定し、前者がミトコンドリア、後者が核でAMY-1と結合し、AMY-1がA-kinaseのcatalytic domainであるPKAcのRIIへの結合を阻害することでA-kinase活性を抑制することを見出した。更に、AMY-1の新規結合タンパク質として精巣、精子特異的なAAT-1を同定し、AMY-1-AAT-1-RII-AKAP84との4量体形成を行ない、A-kinaseのリン酸化基質になることを見出した。精子形成におけるAMY-1,AAT-1の重要性を示唆した。更に、AMY-1ノックアウトマウスを作成し、AMY-1欠損が胎生致死をもたらすことを明かにした。

Research Products

• [Publications] Yukitake et al.: "AAT-1, a novel testis-specific AMY-1-binding protein, forms a quarterly complex between AMY-1, A-kinase anchor protein 84 and a regulatory subunit of cAMP-dependent kinase, and is phosphorylated by its kinase"J. Biol. Chem.. 277. 45480-45492 (2002)
• [Publications] Furusawa et al.: "AMY-1 interacts with S-AKAP84 and AKAP95 in the cytoplasm and the nucleus, respectively, and inhibits cAMP-dependent protein kinase activity by preventing binding of its catalytic subunit to AKAP complex"J. Biol. Chem.. 277. 50885-50892 (2002)
• [Publications] Yukitake et al.: "AMAP-1, a novel testis-specific AMY-1-binding protein, is differentially expressed during the course of spermatogenesis"Biochim. Biophyta Acta. 1577. 126-132 (2002)
• [Publications] Okada et al.: "DJ-1, a target protein for an endocrine disrupter, participates in the fertilization in mice"Biol. Pharm. Bull.. 25. 853-856 (2002)
• [Publications] Kuroda et al.: "The Slp homology domain of synaptotagmin-like proteins 1-4 and Slac2 functions as a novel Rab27A binding domain"J. Biol. Chem.. 277. 9212-9218 (2002)
• [Publications] Saitoh et al.: "Functional domains involved in the interaction between Orc1 and transcriptional repressor AlF-C that bind to an origin/promoter of the rat aldolase B gene"Nucleic Acids Res. 30. 5205-5212 (2002)