2002 Fiscal Year Annual Research Report
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14370744
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
前田 正知 大阪大学, 薬学研究科, 教授 (80190297)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小林 綾子 大阪大学, 薬学研究科, 講師 (90272484)
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| Keywords | GATA因子 / GATA-4 / GATA-6 / DNA結合蛋白 / 転写制御因子 / 翻訳制御 |
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| Research Abstract |
本研究においては、(1)GATA-4やGATA-6の遺伝子上流域(プロモーター)の解析、(2)それらGATA因子の機能領域の解明、(3)精巣のライデイッヒ細胞におけるGATA-4依存の転写の総合的な検討、(4)種々薬剤、化合物、内因性のGATA因子と相互作用する調節物質の探索、などを目的として行い、以下のような成果をこれまでに得た。
(1)GATA因子の発現制御の評価系構築を目指し、心臓、胃、精巣において転写されるGATA-4のmRNA転写開始点の比較を行った。その結果ほぼ同様の位置から開始していることが判り、転写開始の位置は臓器によらないことを明らかにした。
(2)GATA因子の機能の評価系構築を目指し、GATA-4やGATA-6の発現プラスミドを培養細胞に導入し、レポーター遺伝子アッセイが確実に行える実験条件を設定することができた。また、GATA-6のAキナーゼを介する分解経路を明かにする検討を進め、ユビキチンイソペプチダーゼ活性の阻害効果から、確かにプロテアソームを介していることを証明した。
(3)精巣のライデイッヒ細胞におけるGATA-4依存の転写を解明する目的で、マウスのTM3,TM4細胞を用いてレポーター遺伝子アッセイを行う系を確立した。
(4)GATA因子の分子サイズが詳細に検討されていなかったため、特にGATA-6の翻訳を検討し、複数のmetコドンが開始コドンとして使われていることを明らかにし、さらにその選択機構を解明する糸口を得た。
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