2004 Fiscal Year Annual Research Report
高感度検出イムノアッセイによる生体内微量成分の多成分同時捕捉
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14370797
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| Research Institution | Showa University |
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Principal Investigator |
前田 昌子 昭和大学, 薬学部, 教授 (00053869)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
荒川 秀俊 昭和大学, 薬学部, 助教授 (70129807)
伊藤 克敏 昭和大学, 薬学部, 講師 (20223141)
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| Keywords | 二成分同時検出生物発行イムノアッセイ / AK / PPDK / 自閉症発症予測因子 / 齲蝕菌遺伝子 / イクオリン / PSAとPAP / AFP |
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| Research Abstract |
前々年度及び前年度に確立したアセテートキナーゼ(AK)及びピルベートホスフェートジキナーゼ(PPDK)の同時検出系の応用として本年度は自閉症発症予測因子のBDNFとNT-4/5及び齲蝕菌遺伝子のS.ミュータンスとS.ソルビヌスのdex遺伝子の二成分同時測定に応用した.
さらに新たにビオチン化ルシフェラーゼとイクオリンの同時検出法を検討し,これらを標識に用いた生物発光検出イムノアッセイを確立し,前立腺特異抗原(PSA)と前立腺酸性ホスファターゼ(PAP)及びPSAとα-フェトプロテイン(AFP)の同時アッセイ系を開発した.ビオチン化ルシフェラーゼ(最小検出量:3.6x10^<-19>mol/assay)とイクオリン(最小検出量:9.4x10^<-21>mol/assay)の発光は迅速なので,2種の抗原を同時かつ高感度に合計4秒で測定が可能で,スループットのよい方法が確立できた.実試料を用いて市販キットとの相関を検討したところ,PSAではr^2=0.886,AFPではr^2=0.999であった.詳細は研究成果報告書に記載.
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