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2004 Fiscal Year Annual Research Report

シナプスにおけるエンドサイトーシス機能タンパク-膜リン脂質相互作用の解析

Research Project

Project/Area Number 14380306
Research InstitutionOkayama University

Principal Investigator

絹田 正裕  岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 講師 (40135942)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 竹居 孝二  岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (40322226)
山田 浩司  岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (80325092)
Keywordsエンドサイトーシス / 小胞輸送 / 無細胞系 / アンフィファシジン / リポソーム / ダイナミン
Research Abstract

Amphiphysin 1によるDynamin GTPase活性の上昇
Dynamin 1GTPアーゼ活性に対するAmphiphysin 1と膜脂質の影響を調べ、Amphiphysin 1が、大型リポゾームの存在下にDynamin 1のGTPアーゼ活性を上昇することを明らかにした。リポゾームにフォスファチジルセリン、フォスファチジルイノシトール2リン酸などの酸性リン脂質を含まれる場合、特にGTPアーゼ活性の増強効果が高かった。ミュータントAmphiphysin 1を用いた解析により、Dynamin 1GTPアーゼ活性の増強には膜脂質への結合を担うBARドメインと、dynaminとの結合ドメインであるSH3ドメインが必要でであることを明らかにした。また、クラスリン結合部位、AP2結合部位を含む中間部は、Dynamin 1GTPアーゼ活性に対して抑制的に働くことが示唆された。
Amphiphysin 1によるDynamin 1と膜脂質の結合の増加
リポゾームを用いた結合実験により、Amphiphysin 1がDynamin 1と膜脂質の結合を増加させることを明らかにした。この結合増加の一因は、Amphiphysin 1のBARドメインとSH3ドメインを介した間接的結合によるものであることを、ミュータントAmphiphysin 1を用いた解析により明らかにした。
Amphiphysin 1とDynamin 1と脂質膜の結合増加
ミュータントAmphiphysin 1を用いた解析により,Amphiphysin 1とDynamin 1のリング形成にはBARドメインとSH3ドメインが必要であることを明らかにした。また、リング形成とDynamin 1 GTPアーゼ活性の上昇が、Dynamin 1と膜結合性にある程度相関することを示唆した。
以上の成果を論文にまとめ発表した。

  • Research Products

    (1 results)

All 2004

All Journal Article (1 results)

  • [Journal Article] The stimulatory action of amphiphysin on dynamin function is dependent on lipid bilayer curvature.2004

    • Author(s)
      Y.Yoshida et al.
    • Journal Title

      EMBO Journal (印刷中)

URL: 

Published: 2006-07-12   Modified: 2016-04-21  

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