2003 Fiscal Year Annual Research Report

コラーゲン刺激によるDDR2レセプターシグナル伝達およびその機能解析

Research Project

Project/Area Number	14570022
Research Institution	Osaka City University
Principal Investigator	池田一雄大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (80275247)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	河田則文大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 講師 (30271191)
Keywords	DDR2 / コラーゲン / 肝星細胞 / 肝線維化 / Src / Shc / MMP-2
Research Abstract	肝線維化の形成過程において,PDGFRを代表とするRTKやTGFβRシグナルによる肝星細胞の活性化が重要な鍵を握っていることが明らかにされている。 Discoidin Domain Receotor2(DDR2)は,RTKの一つで,そのligandがコラーゲンであることが最近報告されたが,今回,そのシグナル伝達ならびにその機能について詳細に解析した。まず,肝星細胞を用いた,抗DDR2抗体による免疫沈降後のウエスタンブロットにより,DDR2は,Srcと結合することを明らかにすることができた。DDR2と結合するその他の分子を同定するため,Src kinaseを発現させたModified Yeast Two Hybridを行ったところ,Shc adaptor proteinがDDR2と結合した。DDR2ノックアウトマウスから分離した細胞を用い,これにDDR2遺伝子を戻してやると,wild type DDR2がコラーゲン刺激によりリン酸化され,Shcと結合することが明らかになった。さらに,MMP-2の発現がSrc kinaseを含むDDR2シグナルによって誘導されることも明らかになった。そこで,Src kinaseを抑制するために,Dominant Negative SrcをCre-loxPを備えたアデノウイルスベクターに組み込み,コラーゲンプロモーターによりCre recombinaseを発現するアデノウイルスベクターと共に,培養肝星細胞やチオアセトアミド投与障害肝モデルのラットに共感染させると肝星細胞の増殖は抑制され,このとき,同時にDDR2のリン酸化も抑制されており,障害肝モデルでの線維化も組織学的に軽減した。以上,DDR2は,Src kinaseとの相互作用により,そのシグナル伝達が制御されることを明らかにした。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Sato EF et al.: "Oxidative stress-induced cell death of human oral neutrophils."Am J Physiol Cell Physiol.. 284・4. C1048-C1053 (2003)
[Publications] Maeda N. et al.: "Stimulation of proliferation of rat hepatic stellate cells by galectin-1 and galectin-3 through different intracellular signaling pathways."J Biol Chem.. 278・21. 18938-18944 (2003)
[Publications] Inagaki Y. et al.: "Interferon alfa down-regulates collagen gene transcription and suppresses experimental hepatic fibrosis in mice."Hepatology. 38・4. 890-899 (2003)
[Publications] Uyama N. et al.: "Carbenoxolone inhibits DNA synthesis and collagen gene expression in rat hepatic stellate cells in culture."J Hepatol.. 39・5. 749-755 (2003)
[Publications] Matsui H. et al.: "Sulfur-containing amino acids attenuate the development of liver fibrosis in rats through down-regulating stellate cell activation."J Hepatol. (In press).
[Publications] Ikeda K. et al.: "Liver fibrosis and DDR2 signaling."Connective Tissue. 35・3. 165-168 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

コラーゲン刺激によるDDR2レセプターシグナル伝達およびその機能解析

Principal Investigator

池田 一雄 大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (80275247)

Research Products

[Publications] Sato EF et al.: "Oxidative stress-induced cell death of human oral neutrophils."Am J Physiol Cell Physiol.. 284・4. C1048-C1053 (2003)

[Publications] Maeda N. et al.: "Stimulation of proliferation of rat hepatic stellate cells by galectin-1 and galectin-3 through different intracellular signaling pathways."J Biol Chem.. 278・21. 18938-18944 (2003)

[Publications] Inagaki Y. et al.: "Interferon alfa down-regulates collagen gene transcription and suppresses experimental hepatic fibrosis in mice."Hepatology. 38・4. 890-899 (2003)

[Publications] Uyama N. et al.: "Carbenoxolone inhibits DNA synthesis and collagen gene expression in rat hepatic stellate cells in culture."J Hepatol.. 39・5. 749-755 (2003)

[Publications] Matsui H. et al.: "Sulfur-containing amino acids attenuate the development of liver fibrosis in rats through down-regulating stellate cell activation."J Hepatol. (In press).

[Publications] Ikeda K. et al.: "Liver fibrosis and DDR2 signaling."Connective Tissue. 35・3. 165-168 (2003)

池田一雄大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (80275247)