副腎髄質の開口分泌におけるプロテインホスファターゼの役割

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14570089
• Research Institution: The Nippon Dental University
• Principal Investigator: 木村 智彦 日本歯科大学, 新潟歯学部, 教授 (40143002)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 松村 千明 日本歯科大学, 新潟歯学部, 助手 (50277597) ; 桑島 治博 日本歯科大学, 新潟歯学部, 講師 (80139310)
• Keywords: 副腎髄質 / 開口分泌 / カテコールアミン / プロテインホスファターゼ / カルシニューリン / FK506(タクロリムス) / シクロスポリンA / ATP

Research Abstract

プロテインホスファターゼは酵素学的な性質の違いにより4種類(PP1、PP2A、PP2B、PP2C)に分類される。PP2BはCa^<2+>/カルモジュリン依存性プロテインホスファターゼであり、カルシニューリンと称される。FK506(タクロリムス)やシクロスポリンはカルシニューリンを特異的に阻害することで、免疫抑制作用を発揮すると考えられている。本研究では、開口分泌におけるカルシニューリンの役割を明らかにする目的で、副腎髄質カテコールアミン(CA)分泌に対するFK506およびシクロスポリンAの作用を検討した。実験にはウシ副腎髄質培養細胞を用いた。
(結果および結語)
1)非透過性細胞において、FK506はACh、DMPP、K^+脱分極によるCA分泌を濃度依存的に抑制した。
2)透過性細胞において、ATPの有無にかかわらずFK506はCa^<2+>およびカフェインによって引き起こされるCA分泌を抑制した。
3)シクロスポリンは非透過性細胞においてACh、DMPPよるカテコールアミン分泌を軽度に抑制したが、K^+脱分極によるCA分泌および透過性細胞のCa^<2+>によるCA分泌を増強した。
以上の結果から、FK506が副腎髄質細胞においてCA分泌を抑制することが明らかになった。また、FK506とシクロスポリンでは作用が異なることから、それらの作用にカルシニューリンは関与しないことが推察された。副腎髄質細胞におけるCa^<2+>依存性開口分泌の過程は、ATP依存性のプライミング過程と、ATP非存在下でも起こる融合・開口過程の二段階から成ることが知られている。FK506がATP非存在下においてもCA分泌を抑制することから、FK506の作用点は融合・開口過程にあることが推察された。

Research Products

• [Publications] Fukushima et al.: "Role of K^+ channels in the PACAP-induced catecholamine secretion from the rat adrenal gland"European Journal of Pharmacology. 437. 69-72 (2002)
• [Publications] Kuwashima et al.: "Inhibition and facilitaton by pimobendan, a Ca^<2+> sensitizer, of catecholamine secretion from bovine adrenal chromaffin cells"Journal of Pharmacological Science. 91(In press). (2003)