T系前駆細胞の胎仔胸腺への移入に関与するケモカイン・ケモカインレセプターの解析

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14570288
• Research Institution: Meiji College of Oriental Medicine
• Principal Investigator: 雨貝 孝 明治鍼灸大学, 鍼灸学部, 教授 (80094407)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 塚本 紀之 明治鍼灸大学, 医療技術短期大学部, 講師 (80319524) ; 糸井 マナミ 明治鍼灸大学, 鍼灸学部, 講師 (00257833)
• Keywords: マウス / 胸腺 / T前駆細胞 / ケモカイン / ケモカインレセプター / 細胞移入 / 器官形成

Research Abstract

1)我々は正常マウスにおいて胎生11日にT系前駆細胞が胸腺原基間葉系細胞層に集積し、胎生12日に胸腺上皮細胞クラスター内に移動することを示してきた。今回CXCL12ノックアウトマウスにおける胎生11-12日におけるT系前駆細胞の移動について検討したところ、間葉系細胞層への移入においても、胸腺上皮細胞クラスター内への移動においても正常マウスと比較して差が見られなかった。CXCL12ノックアウトマウス胎仔胸腺内では分化過程のT細胞の数が低下していることがわかった。
2)ヌードマウス胸腺原基では、T系前駆細胞の上皮細胞間への移入が起こらないだけでなく、血管芽細胞・血管内皮細胞の胸腺原基間葉系細胞層への著明な集積も認められず、血管形成がおこらなかった。今回、胎仔胸腺期間培養系においてT系前駆細胞からのT細胞の分化と胸腺の器官構築には酸素供給が必須であることを示した。胸腺器官形成には、細胞間相互作用による上皮細胞に分化誘導ばかりでなく、栄養血管の形成も必須であることがわかった。
3)胎仔肝細胞とBW5147細胞のHybridomaはin vivo胎仔肝内投与においても、in vitroでのchemotaxis chamberにおいても胸腺原基への遊走能を持っていたが、Adultマウスの血管内に投与した場合には胸腺への遊走活性が見られなかった。また、FPT-18-3m細胞を用いた胸腺原基への遊走を阻害する単クローン抗体の作成もできていない。そこで、あらたに、現在T系前駆細胞にレトロウイルスベクターを用いてSCFやIL7の遺伝子導入を行い血管を通って<胸腺に選択的に遊走する細胞>の作成を行なっている。
4)血管を介するT系前駆細胞の胸腺移入のAssay系の検討を行い正常骨髄細胞100万個当たり約50個の細胞が胸腺への遊走活性を持っていることがわかった。

Research Products

• [Publications] Ara I, Itoi M, et al.: "A role of CXC chemokine ligand 12/stromal cell-derived factor-1/Pre-B cell growth stimulating factor and its receptor CXCR4 in fetal and adult T cell development in vivo."Journal of Immunology. 170. 4649-4655 (2003)
• [Publications] Germeraad W.T.V, et al.: "Development of thymic microenvironments in vitro is oxygen-dependent and requires permanent presence of T-cell progenitors."Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 51/9. 1225-1235 (2003)