2003 Fiscal Year Annual Research Report
自己免疫性胆管障害を構築する多段階免疫誘導を用いたPBCモデルの作製と病態解析
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14570512
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| Research Institution | Jikei University School of Medicine |
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Principal Investigator |
銭谷 幹男 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助教授 (70138767)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高橋 宏樹 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (80256403)
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| Keywords | PBC / DC / 調節性細胞 / IL-12 |
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| Research Abstract |
§PBCモデルにおける自己反応性T細胞の免疫学的寛容破綻機序の解析
DC投与前後での肝内免疫調節性細胞の動態と機能変化の検討
¶Tr細胞
肝内浸潤単核球を分離し細胞内サイトカイン同定法を用いIL-10、TGF-βを産生するCD4 Tr細胞の動態変化を検討したところ、DC投与前後でその動態の変化は認めなかった。またin vitroでDCと混合培養した肝内CD4陽性細胞のサイトカイン産生プロフィールを解析したところ、IL-10、TGF-β産生動態の変化は認めず、DCによるTr細胞機能変化はなかった。
¶CD25陽性CD4細胞
Regulatory T cell分離キットを用いて肝内CD25、CD4陽性Regulatory T細胞の動態とサイトカイン産生プロフィールを検討したところ、DC投与によりRegulatory T細胞はわずかに減少したが、サイトカイン産生プロフィールに変化を認めなかった。
§炎症性サイトカインによる肝内免疫環境変化の解析
1、炎症性サイトカイン処理SCIDマウスに活性化T細胞投与時の体内動態の検討
IFN-γ、IL-12投与、非投与SCIDマウスにDCを投与した同系マウス脾T細胞をアイソトープラベルし投与、肝内T細胞集積の程度をオートラジオグラフイーにより解析したところ、投与マウスでは非投与マウスに比し肝内へのT細胞集積が増強する傾向を認めた。
2、サイトカイン投与による胆管細胞、類洞内皮細胞補助分子、接着分子発現検討
IFN-γ、IL-12投与マウス類洞内皮細胞のICAM-1、VCAM-1、VAP-1発現、胆管細胞のMHC class I、II、CD80、CD86、CD40等の機能分子発現を免疫組織化学的手法により解析したところ、サイトカイン投与によりそれら分子の発現増強が認められた。
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