2003 Fiscal Year Annual Research Report

ウイルソン病変異蛋白発現の細胞生物学的意義

Research Project

Project/Area Number	14570528
Research Institution	Kurume University
Principal Investigator	原田大久留米大学, 医学部, 講師 (00241175)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	中村徹久留米大学, 医学部, 助手 (30341332) 古賀浩徳久留米大学, 医学部, 助手 (90268855) 鳥村拓司久留米大学, 医学部, 助教授 (60197986)
Keywords	中間系線維 / マロリー体 / aggresome / プロテアソームゴルジ装置
Research Abstract	真核細胞において蛋白は遺伝子の転写、翻訳によりポリペプチドとして形成された後に三次元的立体構造をとる(folding)。様々な原因により正しくfoldingされない異常蛋白が産生されるが、これらはプロテアソームにおいて分解を受ける。異常蛋白の産生が細胞の分解能を越えると細胞内にaggresomeと呼ばれる中間径線維(IF)の関与する凝集体(inclusion body=IC)が形成される。ウイルソン病変異蛋白を発現させた細胞でも変異蛋白とIFからなる凝集体が形成される。しかし、ICの細胞生物学的な意義は明らかではない。我々は二種の方法でICを形成させ、IFと細胞内小器官の形態を共焦点レーザー顕微鏡で観察、さらに電子顕微鏡(TEM)を用いて超微形態を観察した。培養細胞へプロテアソーム阻害剤(ALLN)を24時間作用させると細胞にICが形成され、IFのnetworkが消失した。 TEMではこの構造は膜を有さず、線維成分に囲まれ、電子密度の高い沈着物を含む構造物として観察された。また細胞に変異CKを遺伝子導入すると同様のICが形成された。これらの細胞ではゴルジ局在蛋白が細胞内に点在して観察された。ALLN添加後、ALLNを除去して培養するとICは消失し、IFのnetworkとゴルジ装置の形態が回復していた。TEMによる観察では多くのautophagic vacuoleやライソゾームが観察された。プロテアソーム機能の阻害によりマロリー体類似のICが形成され、それらの細胞ではゴルジ装置の形態に変化を認め、その機能に影響が及んでいると推測された。プロテアソーム機能の回復によりICは可逆性に消失し、その除去にはautophagyを介した処理機構が関与していると考えられた。変異CK導入細胞においても同様の現象がみられ、これらの影響はIFの変化を介したものと考えられた。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Harada M et al.: "Where is the site that ATP7B transports copper within hepatocytes?"Gastroenterology. 125. 1911-1912 (2003)
[Publications] Harada M et al.: "Proteasome inhibition induces inclusion bodies associated with intermediate filaments and fragmentation of the Golgi apparatus."Exp Cell Res.. 288(1). 60-69 (2003)
[Publications] Harada M et al.: "Unusual hyperbilirubinemia associated with bacterial pneumonia and acute myeloid leukemia."Hepatol Res.. 26(2). 114-118 (2003)
[Publications] Harada M et al.: "Wilson disease protein ATP7B is localized in the late endosomes in a polarized human hepatocyte cell line."Int J Mol Med.. 11(3). 293-298 (2003)
[Publications] 原田大他: "ウイルソン病"肝臓. 44. 501-505 (2003)
[Publications] 原田大他: "ウイルソン病蛋白ATP7Bならびにその変異蛋白の細胞内局在"肝の生化学箱根シンポジウム. 10. 108-110 (2003)
[Publications] 原田大他: "慢性肝内胆汁うっ滞と銅代謝の分子機構"肝疾患と生体元素. 1. 89-97 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

ウイルソン病変異蛋白発現の細胞生物学的意義

Principal Investigator

原田 大 久留米大学, 医学部, 講師 (00241175)

Research Products

[Publications] Harada M et al.: "Where is the site that ATP7B transports copper within hepatocytes?"Gastroenterology. 125. 1911-1912 (2003)

[Publications] Harada M et al.: "Proteasome inhibition induces inclusion bodies associated with intermediate filaments and fragmentation of the Golgi apparatus."Exp Cell Res.. 288(1). 60-69 (2003)

[Publications] Harada M et al.: "Unusual hyperbilirubinemia associated with bacterial pneumonia and acute myeloid leukemia."Hepatol Res.. 26(2). 114-118 (2003)

[Publications] Harada M et al.: "Wilson disease protein ATP7B is localized in the late endosomes in a polarized human hepatocyte cell line."Int J Mol Med.. 11(3). 293-298 (2003)

[Publications] 原田 大 他: "ウイルソン病"肝臓. 44. 501-505 (2003)

[Publications] 原田 大 他: "ウイルソン病蛋白ATP7Bならびにその変異蛋白の細胞内局在"肝の生化学 箱根シンポジウム. 10. 108-110 (2003)

[Publications] 原田 大 他: "慢性肝内胆汁うっ滞と銅代謝の分子機構"肝疾患と生体元素. 1. 89-97 (2003)

原田大久留米大学, 医学部, 講師 (00241175)

[Publications] 原田大他: "ウイルソン病"肝臓. 44. 501-505 (2003)

[Publications] 原田大他: "ウイルソン病蛋白ATP7Bならびにその変異蛋白の細胞内局在"肝の生化学箱根シンポジウム. 10. 108-110 (2003)

[Publications] 原田大他: "慢性肝内胆汁うっ滞と銅代謝の分子機構"肝疾患と生体元素. 1. 89-97 (2003)