2003 Fiscal Year Annual Research Report
レボドパによって特異的に発現誘導される脳内遺伝子の探索とその機能解析
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14570599
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
小川 紀雄 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (90033208)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
浅沼 幹人 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教授 (00273970)
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| Keywords | パーキンソン病 / レボドパ / アポトーシス / ミトコンドリア / PAG608 / p53 / 6-OHDA / 大脳基底核 |
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| Research Abstract |
1.ドパミン神経細胞死におけるPAG608の作用機構に関する検討
昨年度までに,片側パーキンソン病モデルラットにレボドパを投与し,傷害側線条体において発現が誘導されるDOPA-induced parkinsonism遺伝子としてp53-activated gene 608 (PAG608)を同定し,PAG608が翻訳後修飾あるいは蛋白間の相互作用によってアポトーシス発現を調節・修飾しており,さらにp53によって発現誘導されるPAG608は逆にp53発現を誘導しうることを明らかにした.本年度は,PAG608のドパミン神経細胞死における作用機構をさらに詳細に明らかにするための検討を行った.を樹立した.
(1)6-OHDAあるいはH2O2暴露によるPC12細胞の細胞生存率の低下が,PAG608アンチセンスcDNAを恒常的に過剰発現しているPAG608発現抑制PC12細胞株(PC12/PAG608AS)では,ほぼ完全に抑制されていた.しかし,p53を介さないMPP^+暴露による細胞死に対してはPC12/PAG608AS細胞による抑制はみられなかった.
(2)6-OHDA添加により空ベクター導入PC12(PC12/CTL)細胞では,カスパーゼ-3の活性化とTUNEL法によるDNAの断片化の増加,ミトコンドリアの膜電位の低下,さらにp53蛋白質またはBax蛋白質の発現増加が認められたが,6-OHDAを添加されたPC12/PAG608AS細胞ではそれらの有意な変化はみられなかった.
(3)空ベクターを遺伝子導入したGFP陽性PC12細胞数は6-OHDA添加によって減少したが,N末端の第一ジンクフィンガードメインを欠失させたHis-ΔN522発現ベクターを導入したGFP陽性細胞では6-OHDAによる細胞数の減少が抑制され,PAG608の核への局在が阻害されていた.
これらの結果より,元来p53によって誘導される分子とされているPAG608は酸化ストレスによるドパミン神経細胞のアポトーシスにおいて,ミトコンドリア障害より上流の過程で(おそらく核内で),逆にp53ならびにBaxの発現を誘導し,ミトコンドリアの膜電位の低下を惹起している可能性を示した.
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Research Products
(7 results)
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[Publications] Asanuma, M., et al.: "Dopamine- or L-DOPA-induced neurotoxicity : the role of dopamine quinone formation and tyrosinase in a model of Parkinson's disease."Neurotox.Res.. 5・3. 165-176 (2003)
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[Publications] Haque, M.E., et al.: "Overexpression of Cu-Zn superoxide dismutase protects neuroblastoma cells against dopamine cytotoxicity accompanied by increase in their glutathione level."Neurosci.Res.. 47・3. 31-37 (2003)
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[Publications] Asanuma, M., et al.: "Methamphetamine-induced neurotoxicity in mouse brain is attenuated by ketoprofen, a non-steroidal anti-inflammatory drug."Neurosci.Lett.. 352・1. 13-16 (2003)
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[Publications] Diaz-Corrales, F.J., et al.: "Rotenone induces disassembly of the Golgi apparatus in the rat dopaminergic neuroblastoma B65 cell line."Neurosci.Lett.. 354・1. 59-63 (2004)
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[Publications] Higashi, Y., et al.: "Parkin attenuates manganese-induced dopaminergic cell death."J.Neurochem.. (in press). (2004)
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[Publications] Tanaka, K., et al.: "Molecular basis of anti-apoptotic effects of immunophilin ligands on hydrogen peroxide-induced apoptosis in human glioma cells."Neurochem.Res.. (in press). (2004)
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[Publications] Asanuma, M., et al.: "Neuroprotective effects of nonsteroidal anti-inflammatory drugs on neurodegenerative diseases."Current Pharmaceutical Design. (in press). (2004)
