FISH法を用いたG2とM期の染色体変異解析による放射線感受性の定量と臨床応用

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14570838
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 川田 哲也 千葉大学, 大学院・医学研究院, 講師 (60234077)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 有賀 隆 千葉大学, 医学部附属病院, 助手 (20261901) ; 宇野 隆 千葉大学, 大学院・医学研究院, 講師 (30302540) ; 伊東 久夫 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (20095574) ; 磯部 公一 千葉大学, 医学部附属病院, 助手 (80334184)
• Keywords: FISH / 染色体変異 / 放射線感受性 / 放射線治療

Research Abstract

本研究は、G2アッセイおよびMFISH(Multiple Fluorescence in situ hybridization)法を行うことにより、腫瘍細胞および正常細胞の放射線感受性を予測する方法を開発し、臨床応用することを目的として、以下の研究を行うこと予定を作成した。すなわち、増殖期G2リンパ球に低線量のX線(0.5-1.0Gy)を照射し、1時間後にM期に到達した細胞の染色分体切断数を測定するG2アッセイが開発されている。我々はこの手法をヒト正常繊維芽細胞、放射線感受性が著しく高いことが知られているAtaxia Telangiectasia(AT)細胞、および感受性の異なる腫瘍細胞群に用いて感受性の違いをM期の染色分体切断頻度の差から検討を行う。同時にG2アッセイで得られたM期染色体異常頻度と、Calyculin-Aを用いて早期に凝集させたG2期の染色分体切断数との比較を行い、G2/M期のCheckpoint機構と放射線感受性との関連性を検討する。また、G2アッセイの結果とG0期細胞の放射線感受性の関連を調べるため、G0細胞の放射線による生存曲線と比較検討する。本年度は、(1)ヒト正常繊維芽細胞、ヒトAtaxia Telangiectasia由来の繊維芽細胞および6種類の確立された癌細胞にX線照射を行い(1-8Gy)、正常細胞とAT細胞における放射線感受性の違いを線量生存率曲線から明確にした。(2)G2アッセイにより各々の細胞の放射線に対する染色体異常頻度を測定し、正常細胞とAT細胞で発生する染色体異常と、細胞致死効果の違いを検討した。

Research Products

• [Publications] TETSUYA KAWATA: "Induction of Chromatin Damage and Distribution of Isochromatid Breaks in Human Fibroblast Cells Exposed to Heavy Ions"J Rad Res. (in press).
• [Publications] TETSUYA KAWATA: "Radiation-Induced Chromosome Aberrations in Ataxia Telangiectasia Cell Line : high frequency of deletions and misrejoining detected by fluorescence in situ"Rad Res. (in press).