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2003 Fiscal Year Annual Research Report

PPARγと異なる新たな脂肪細胞分化特異的PDE3B遺伝子転写活性化因子の同定

Research Project

Project/Area Number 14571097
Research InstitutionEhime University

Principal Investigator

大澤 春彦  愛媛大学, 医学部, 助教授 (90294800)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 大沼 裕  愛媛大学, 医学部, 助手 (00294794)
牧野 英一  愛媛大学, 医学部, 教授 (50009578)
KeywordsPDE3B / プロモーター / 転写因子 / PPARγ / 脂肪細胞 / 分化 / インスリン抵抗性 / 糖尿病
Research Abstract

脂肪細胞ホスホジエステラーゼ3B (PDE3B)はインスリンにより活性化され脂肪分解を抑制し血中遊離脂肪酸(FFA)を低下させる。血中FFA上昇はインスリン抵抗性をきたす。すなわち、PDE3B遺伝子発現を特異的に増強すれば、インスリン抵抗性が改善する可能性がある。本研究では、peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR)結合部位を欠くマウスPDE3Bプロモーター領域を用いて、脂肪細胞分化によるPDE3B転写活性化の責任DNAエレメント及びその結合転写因子を同定し、PPARγとは異なる新たなインスリン抵抗性改善剤の標的を見出すことを目的とする。
まず、マウスPDE3B5'領域を、2kbから種々の長さに欠失させたルシフェラーゼレポーターコンストラクトを作製した。一方、ヒトPDE3Bプロモーターをクローニングし、解析したがやはり有意なPPAR結合部位を認めなかった。
そこで、ヒトプロモーターも解析した。まず、primer extensionにより転写開始点を決定した。次に、2kbの領域について2型糖尿病24名をPCR直接シークエンスし同定した高頻度のSNPについて、対照200名、2型207名をタイピングした。その結果、5%以上の頻度で同定した-465G>Tと-1727_-726insTCAATTは完全な連鎖不平衡にあった。-465G>T単独、及び既報の+1389G>Aとによるハプロタイプは2型と関連しなかった。-465T/Tは2型に多い傾向があったが、稀であった。以上より、PDE3B遺伝子のSNPは、日本人2型糖尿病感受性に影響する主要な因子ではないことが想定された。
さらに、ヒトPDE3Bプロモーターのルシフェラーゼレポーターの作製を終え、マウスのレポーターと共にルシフェラーゼアッセイを行った。また、ヒトで同定した2つのSNPについては、その転写因子結合能への効果をゲルシフトアッセイにより解析した。

  • Research Products

    (3 results)

All Other

All Publications (3 results)

  • [Publications] Osawa, H.et al.: "Systematic search for single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the 5' flanking region of the human phosphodiesterase 3B gene : Absence of evidence for major effects of identified polymorphisms on susceptibility to Japanese type 2 diabetes."Mol Genet Metab. 79. 43-51 (2003)

  • [Publications] Osawa, H.et al.: "Systematic search for single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the FOXC2 gene : The absence of evidence for the association of three frequent SNPs and fourcommon haplotypes with Japanese type 2 diabetes."Diabetes. 52. 562-567 (2003)

  • [Publications] Ogura, T.et al.: "Reduction of phosphodiesterase 3B gene expression in peroxisome proliferator-activated receptor γ (+/-) mice independent of adipocyte size."FEBS Left. 542. 65-68 (2003)

URL: 

Published: 2005-04-18   Modified: 2016-04-21  

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