2002 Fiscal Year Annual Research Report
抗血管新生因子NK4遺伝子及び自殺遺伝子を併用した肝癌に対する遺伝子治療の研究
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14571246
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| Research Institution | Hyogo Medical University |
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Principal Investigator |
平野 公通 兵庫医科大学, 医学部, 助手 (90340968)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
植木 孝浩 兵庫医科大学, 医学部, 助手 (10309461)
飯室 勇二 兵庫医科大学, 医学部, 助教授 (30252018)
藤元 治朗 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (90199373)
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| Keywords | NK4 / 肝癌 / 遺伝子治療 |
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| Research Abstract |
肝細胞癌(肝癌)に対する新しいstrategyとして癌の浸潤・転移・腫瘍血管新生抑制作用を持つHGF antagonistであるNK4(malignostatin)を用いて難治癌の本態である浸潤・転移能、腫瘍血管新生を抑制する新たな遺伝子治療制癌戦略について研究を進めている。
(1)NK4はHGFのレセプターであるc-Metの活性化を競合的に阻害することにより癌細胞の浸潤・転移を抑制すると考えられるが、大量のNK4発現が必要となるため、血中で高発現が期待できるhydrodynamics-based transfection(H-D)法を用いてマウスへNK4を遺伝子導入したところ、9ng/mlを越える発現が確認された。
次いで同遺伝子導入法を用いてマウス肝癌皮下腫瘍モデルにNK4遺伝子導入を行い腫瘍抑制効果を検討したところ、コントロールのLacZ遺伝子導入群に比して増殖抑制認めたが有意差はなかった。
(2)H-D法では腫瘍増殖抑制を行えるほどのNK4発現を得られないと考え、NK4をcodeするアデノウイルスベクター(Ad-NK4)を使用することとし、マウス血中NK4濃度を測定したところ、250ng/mlとH-D法に比して著明な遺伝子発現を得ることができた。マウス肝癌皮下腫瘍モデルにAd-NK4をtail veinよりi.v.、腫瘍へ直接導入の二通りで導入行ったところ、両群ともに有意差をもって腫瘍抑制効果を認め、直接導入では腫瘍はほぼ消失した。CD31免疫染色によりAd-NK4を導入した腫瘍はコントロールに比して著明に新生血管が抑制されていることが確認された。
現在、より臨床に則したモデルとして免疫不全マウス肝腫瘍モデルおよびラット肝発癌モデルを作製しNK4の肝腫瘍に対する効果を組織学的・分子生物学的に検討中である。
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