血管壁へのウイルスベクターを用いない遺伝子導入法の開発 冠動脈バイパス術後の静脈グラフト不全への遺伝子治療を目指して

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14571272
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 帯刀 英樹 九州大学, 医学部附属病院, 助手 (40343321)
• Keywords: 冠動脈バイパス手術 / 遺伝子療法 / MCP-1 / 静脈グラフト

Research Abstract

本研究の目的は、心臓血管外科領域において中心となる手術のひとつである冠動脈バイパス手術術後の静脈グラフト閉塞に対する安全で且つ導入効率の高い遺伝子導入法の開発と治療法への応用を実施することである。ウイルスベクターを用いない方法で導入効率の高い遺伝子導入法を行うことが最終目標であるが、第一段階として比較となるウイルスベクターの静脈グラフトへの導入効果の確認と本施設にて報告してきた血管炎症初期に認められる単球の遊走を阻害する変異型MCP-1遺伝子が静脈グラフト閉塞抑制効果を有するかの確認を行った。
成犬の大腿静脈を静脈グラフトとしてex vivoでアデノウイルスを用いて変異型MCP-1遺伝子を導入した後、大腿動脈に移植した。静脈グラフト移植期間は1ヶ月で移植後のマクロファージ等の炎症細胞浸潤、血管内膜肥厚と平滑筋細胞の増殖を組織切片にて行った。内膜外膜比の測定による内膜肥厚の程度、免疫組織染色による炎症細胞浸潤数と細胞増殖の程度は、変異型MCP-1遺伝子を導入することで有意に抑制された。
成犬の大腿静脈をグラフトとして大腿動脈に移植するモデルで変異型MCP-1遺伝子導入効果の確認が得られたことから、第二段階として現在、ウイルスベクターを用いず組織に電場をかけて遺伝子を導入するelectroporation法での導入効率の検討を行っている。電場強度、刺激回数の調整を行い導入効率とともにelectroporation法に伴う細胞障害の程度から至適条件を検討中である。