ヒト腎細胞癌のMN/CA9発現における、低酸素状態、低メチル化、VHL異常の役割

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14571515
• Research Institution: Nara Medical University
• Principal Investigator: 植村 天受 奈良県立医科大学, 医学部, 助教授 (90213397)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉川 和宏 愛知医科大学, 医学部, 講師 (60109759) ; 藤本 清秀 奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (50264867) ; 平尾 佳彦 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (00133207)
• Keywords: 腎細胞癌 / MN / CA9 / VHL / DNAメチル化

Research Abstract

われわれは腎細胞癌の90%に発現している癌関連抗原MN/CA9の遺伝子発現にプロモーター領域の低メチル化が重要であることを明らかにしてきた腎細胞癌におけるMN/CA9遺伝子発現に、低酸素応答を介した系とVHLの異常を介した系の存在が考えられる。
今回の研究では、腎細胞癌培養細胞を用いて、低酸素状態およびVHL蛋白異常とMN/CA9発現の関係について調べることにより、MN/CA9発現の機序を明らかにすることを目的とした。6種類の腎細胞癌培養株(SK-RC1,7,10,12,14,44)およびコントロールとしてMN/CA9陰性/VHL正常のGlioblastoma細胞株(U87MG)を用いてpVHL異常とMN/CA9発現の関係について検討した。6種類の腎癌細胞株すべてVHL gene alterationがあったが、MN/CA9発現はSK-RC1,10,44の3種類であった。そこでSK-RC1に注目しwild type VHL geneを遺伝子導入するとこれまでの報告どおりMN/CA9はdown regulationした。また、このtransfectant (SK-RC1/VHL)やU87MG (VHL normal)をhypoxia下に培養するとMN/CA9を再び誘導したが、親株(SK-RC1)はhypoxiaにても変化がなかった。一方、VHL異常があるにも関わらずMN/CA9発現のないSK-RC14にwtVHLを導入してもhypoxia状態にしてもMN/CA9の発現は認められなかった。これらから、MN/CA9陰性のcell lineでは、VHLの異常にかかわらず、VHL-HIF1 pathwayはmain pathwayでなく他のpathwayが存在することが示唆された。

Research Products

• [Publications] T Shimazui, K Yoshikawa, H Uemura et al.: "Detection of cadherin-6 mRNA by nested RT-PCR as a potential marker for circulating cancer cells in renal cell carcinoma"Int J Oncol. 23(4). 1049-1054 (2003)
• [Publications] K Shimizu, H Uemura et al.: "Induction of antigen specific cellular immunity by vaccination with peptides from MN/CAIX in renal cell carcinoma (学位論文)"Oncol Report. 10(5). 1307-1311 (2003)
• [Publications] H Uemura, Y Nakagawa et al.: "Detection of circulating MN/CA9 positive renal cell carcinoma cells during operation"Aktuel Urol. 34. 270-272 (2003)
• [Publications] K Gramajer, M deWeijert, H Uemura et al.: "Renal cell carcinoma-associated methylation and expression : in vivo and in vitro studies"Urology. 60. 357-362 (2002)
• [Publications] 植村天受, 平尾佳彦: "流血中腎癌細胞の検出方法と臨床的意義"癌と化学療法. 29(10). 1712-1718 (2002)