2002 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト羊水由来癌転移抑制物質を用いた卵巣癌遺伝子治療に関する基礎研究

Research Project

Project/Area Number	14571553
Research Institution	Hamamatsu University School of Medicine
Principal Investigator	小林浩浜松医科大学, 医学部附属病院, 講師 (40178330)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	鈴木光明自治医科大学, 医学部, 教授 (50110870) 西口富三浜松医科大学, 医学部附属病院, 講師 (30198452)
Keywords	癌転移抑制 / 遺伝子治療 / ビクニン
Research Abstract	我々は以前にヒト羊水中に癌細胞の浸潤を抑制する物質が存在することを報告した。この物質を精製し、アミノ酸配列を検索した結果インターアルファトリプシンインヒビター(ITI)の軽鎖であり、ビクニン(我々は尿中トリプシンインヒビター[UTI]と呼んでいた物質)と同一のものであった。ITIはビクニンと2本の重鎖より構成されているが、このITIには癌浸潤抑制作用はみられない。これはビクニンの活性基が2本の重鎖によりマスクされているからである。ビクニンの本来の生理活性はその名前の示すごとトリプシン抑制であるのでトリプシン・プラスミンなどの酵素阻害作用を有する物質であり、ヒト羊水以外にも尿中に豊富に含まれていることが判明している。これまでに判明しているビクニンの機能として、 1)マウスおよびヒト癌細胞においてprotein kinase CおよびMAP kinaseに関与する蛋白質、たとえばERKなどのリン酸化を抑制することによりウロキナーゼおよびウロキナーゼ・リセプター発現をmRNAのレベルで抑制した。 2)癌細胞の浸潤、転移を抑制することが証明された。 3)癌細胞にビクニン遺伝子を導入することによりマウスにおける卵巣癌転移を著明に抑制し、生存率を延長させることができた。 4)ビクニンは血管内投与、腹腔内投与、皮下投与、遺伝子導入のいずれの系でも毒性は認めなかった。以上の結果より、癌転移抑制におけるビクニン治療(遺伝子治療も含めて)の安全性、有効性が確認された。そこで平成14年度には1)ビクニン遺伝子治療のため、アデノ随伴ウイルスベクターを作成した。2)これを用いてヒト卵巣癌細胞を移植したマウスに対する感染実験を行った。3)ビクニン蛋白質をヒト卵巣癌HRAに遺伝子導入することにより培養上清からリコンビナントビクニンを精製した。4)これを大量精製して浸透圧ポンプを埋め込んだ担癌マウスに対する治療を行っており、有効な生存を確認したところである。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Kobayashi H., et al.: "Suppression of urokinase receptor expression by bikunin is associated with inhibition of upstream targets of extracellular..."Eur.J Biochem.. 269. 3945-3957 (2002)
[Publications] Kobayashi H., et al.: "CD44 stimulation by fragmented hyaluronic acid induces upregulation and tyrosine phosphorylation of c-Met receptor protein..."Biochim.Biophys.Acta. 1591. 37-44 (2002)
[Publications] Sun, GW., Kobayashi H.: "CD44 stimulation by fragmented hyaluronic acid induces upregulation of urokinase-type plasminogen activator and its receptor..."Int.J.Cancer 102;379-389,2002. 102. 379-389 (2002)
[Publications] Kobayashi H., et al.: "Link protein as an enhancer of cumulus cell-oocyte complex expansion"Mol.Reprod.Develop.63;223-231,2002. 63. 223-231 (2002)
[Publications] Tanaka Y, Kobayashi H., et al.: "Thymidine phosphorylase expression in tumor-infiltrating macrophage may be correlated with poor prognosis in uterine endometrial cancer"Hum.Pathol. 33. 1105-1113 (2002)
[Publications] Kobayashi H., et al.: "Kunitz-type protease inhibitor bikunin disrupts phorbol ester-induced oligomerization of CD44 variant isoforms containing epitope v9..."J Biol Chem.. 277. 8022-8032 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト羊水由来癌転移抑制物質を用いた卵巣癌遺伝子治療に関する基礎研究

Principal Investigator

小林 浩 浜松医科大学, 医学部附属病院, 講師 (40178330)

Research Products

[Publications] Kobayashi H., et al.: "Suppression of urokinase receptor expression by bikunin is associated with inhibition of upstream targets of extracellular..."Eur.J Biochem.. 269. 3945-3957 (2002)

[Publications] Kobayashi H., et al.: "CD44 stimulation by fragmented hyaluronic acid induces upregulation and tyrosine phosphorylation of c-Met receptor protein..."Biochim.Biophys.Acta. 1591. 37-44 (2002)

[Publications] Sun, GW., Kobayashi H.: "CD44 stimulation by fragmented hyaluronic acid induces upregulation of urokinase-type plasminogen activator and its receptor..."Int.J.Cancer 102;379-389,2002. 102. 379-389 (2002)

[Publications] Kobayashi H., et al.: "Link protein as an enhancer of cumulus cell-oocyte complex expansion"Mol.Reprod.Develop.63;223-231,2002. 63. 223-231 (2002)

[Publications] Tanaka Y, Kobayashi H., et al.: "Thymidine phosphorylase expression in tumor-infiltrating macrophage may be correlated with poor prognosis in uterine endometrial cancer"Hum.Pathol. 33. 1105-1113 (2002)

[Publications] Kobayashi H., et al.: "Kunitz-type protease inhibitor bikunin disrupts phorbol ester-induced oligomerization of CD44 variant isoforms containing epitope v9..."J Biol Chem.. 277. 8022-8032 (2002)

小林浩浜松医科大学, 医学部附属病院, 講師 (40178330)