cDNAマイクロアレイによるトキソプラズマ性網脈絡膜炎発症機序の遺伝的解析

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14571657
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 野呂瀬 一美 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助手 (30156244)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岩倉 洋一郎 東京大学, 医科学研究所, 教授 (10089120) ; 矢野 明彦 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (20135122) ; 青才 文江 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (80150316)
• Keywords: トキソプラズマ性網脈絡膜炎 / マイクロアレイ / ブドウ膜炎 / インターフェロン ガンマ / 網膜血管炎

Research Abstract

1.細胞内寄生体トキソプラズマにより引き起こされるトキソプラズマ性細脈絡膜炎は、インターフェロンガンマ(IFN-γ)がその発症機序に関与していることをわれわれはすでに報告した。今回の研究においては、多数の遺伝子の発現状態やゲノムの変異を大規模に同時並行で検出できるcDNAマイクロアレイを用いてトキソプラズマ性網脈絡膜炎に関与する多数の遺伝子の発現調整機構を解析することを目的とした。
2.トキソプラズマFukaya弱毒株のシストを野生型のトキソプラズマ感受性マウスC57BL/6およびC57BL/6由来IFN-γKOマウスに経口投与し、経時的に散瞳下で眼底検査を行い、網脈絡膜炎の有無を観察した結果、C57BL/6由来IFN-γKOマウスにおいて、感染後約10日で、網膜血管炎が認められた。
3.トキソプラズマ感染後、経時的に眼球を摘出し、DNAを作成し、定量的競合的(QC)-PCR法で眼内のトキソプラズマDNAを検索し、検眼鏡にて検出不可能な微細なトキソプラズマ原虫の眼内浸潤の有無を検討した結果、野生型マウスにおいては、網膜に、IFN-γKOマウスにおいては、主に虹彩、脈絡膜にトキソプラズマDNAが認められた。また、経時的に眼球を摘出し、病理学的に検討を加えた。
4.トキソプラズマ非感染正常マウスの眼由来のmRNAから作成したcDNAマイクロアレイを用いて、トキソプラズマ原虫感染抵抗性マウスBALB/c野生型 対 BALB/c IFN-γKOマウス およびトキソプラズマ原虫感染抵抗性マウスBALB/c野生型 対 感受性マウスC57BL/6野生型の組み合わせによってトキソプラズマ原虫感染に特異的に発現変動(2倍以上あるいは1/2倍以下)する遺伝子の検索を行っている。

Research Products

• [Publications] Norose K, Yano A, Zhang XM, Blankenhorn E, Heber-Katz E: "Mapping of genes involved in murine herpes simplex virus keratitis : identification of genes and their modifiers"J Virol. 76(7). 3502-3510 (2002)
• [Publications] Chen M, Aosai F, Norose K, Mun H-S, Takeuchi O, Akira S, Yano A: "Involvement of MyD88 in host defense and the down-regulation of anti-heat shock protein 70 autoantibody formation by MyD88 in Toxoplasma gondii-infected mice"J Parasitol. 88(5). 1017-1019 (2002)
• [Publications] Aosai F, Chen M, Kang H-K, Mun H-S, Norose K, Piao L-X, Kobayashi M, Takeuchi O, Akira S, Yano A: "Toxoplasma gondii-derived heat shock protein HSP70 functions as a B cell mitogen"Cell Stress Chaperones. 7(4). 357-364 (2002)
• [Publications] Chen M, Aosai F, Norose K, Mun H-S, Yano A: "The role of anti-HSP70 autoantibody-forming V_H1-J_H1 B-1 cells in Toxoplasma gondii-infected mice"Int Immunol. 15(1). 39-47 (2003)
• [Publications] Yano A, Mun H-S, Chen M, Norose K, Hata H, Kobayashi M, Aosai F, Iwakura Y: "Roles of IFN-γ on stage conversion of an obligate intracellular protozoan parasite, Toxoplasma Gondii"Intern Rev Immunol. 21. 405-421 (2002)
• [Publications] 矢野 明彦, 直井 幸二, 野呂瀬 一美, 青才 文江: "トキソプラズマ症"化学療法の領域. 18(4). 481-486 (2002)
• [Publications] Aosai F, Chen M, Kang H-K, Mun H-S.Piao L-X, Norose K, Takeuchi O, Akira S, Yano A: "Proceedings of the 10^<th> International Congress of Parasitology-ICOPA X"Functional analysis of Toxoplasma gondii-derived HSP70 functions as a B cell mitogen. 6 (2002)