2003 Fiscal Year Annual Research Report

弱毒単純ヘルペスウイルスベクターの神経筋疾患治療への応用のための基礎研究

Research Project

Project/Area Number	14572154
Research Institution	TOYAMA MEDICAL AND PHARMACEUTICAL UNIVERSITY
Principal Investigator	黒川昌彦富山医科薬科大学, 医学部, 助教授 (80186527)
Keywords	遺伝子治療 / 単純ヘルペスウイルスベクター / 脊髄神経細胞 / 筋組織 / 神経筋疾患治療
Research Abstract	中枢神経系で外来遺伝子であるβ-ガラクトシダーゼを長期的に発現できる弱毒HSVベクター(βH)を用いて、神経保護作用のあるBDNF(神経栄養因子)、NGF(神経成長因子)遺伝子を外来遺伝子として本ベクターに挿入し、将来の遺伝子治療への応用の可能性を検討している。今年度は、神経細胞生存に有用な外来遺伝子産物の中枢神経系機能に与える影響を検討するために、種々の外来遺伝子を容易に挿入できるカセットを作製し、このカセットにBDNF遺伝子を挿入して作製した組換えウイルスベクターの安定性を検討している。また、これと平行してこれまで解析してきたラットの腓腹筋接種モデルを用いて、中枢神経系に導入されたβHベクターのウイルス抗原の分布と感染性ウイルス粒子形成の可能性を脊髄と脊髄後根神経節で比較検討した。βHをラットの右腓腹筋に接種後10ヶ月後でも両側脊髄前角神経細胞にβ-gal活性、β-galmRNA,ウイルス蛋白質gC、TKとそれらのmRNAが検出できた。しかし、脊髄には感染性ウイルスが認められなかった。長期での脊髄後根神経節でのウイルス遺伝子発現が認められないことから、脊髄後根神経節とは異なる脊髄での発現様相が明らかになった。一方、接種後3ヶ月では両足腓腹筋にβ-gal活性が認められたが、10ヶ月後では検出できなかった。いずれの場合にも組織学的に異常な所見は認められなかった。さらに、接種後7日、3ヶ月目の両側のラット坐骨神経線維の電気刺激閾値、坐骨神経刺激による腓腹筋の刺激閾値にβH1接種の影響が認められなかった。したがって、脊髄でβ-gal活性,βgal mRNAあるいはウイルスmRNA,抗原が、腓腹筋でβ-gal活性が長期に渡って認められたにもかかわらず、神経、筋での電気生理学的機能に影響が認められなかったことよりβHの神経、筋での発現に対する安全性が確認できた。今後、BDNFを挿入したHSVベクターを用いて、外来遺伝子発現、活性の分布、中枢神経系における生理学的機能の検討を行い、外来遺伝子発現による中枢神経系機能変化を明らかにしたい。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Kurokawa, M., Brown, J., Kagawa, Y., Shirak,.K.: "Cytokine-regulatory activity and therapeutic efficacy of cinnamyl derivatives in endotoxin shock"Eur.J.Pharm.. 474. 283-293 (2003)
[Publications] Okuda, T., Kurokawa, M.et al.: "Suppression of generation and replication of acyclovir-resistant herpes simplex virus by a sensitive virus"J.Med.Virol.. 72. 112-120 (2004)
[Publications] Fukuda, Y., Yamamura, J.et al.: "Regulated transgene delivery by ganciclovir in the brain without physiological alterations by a live attenuated herpes simplex virus vector"Neurroscience Res.. 45. 233-241 (2003)
[Publications] Phumiamorn, S., Sato, H.et al.: "Induction of humoral and cell-mediated immunity to hepatitis B surface antigen by a novel aduvant activity of Oka varicella vaccine"J.Gen.Virol.. 84. 287-291 (2003)
[Publications] Lipipun V., Kurokawa M.et al.: "Efficacy of Thai medicinal plant extracts against herpes simplex virus type 1 infection in vitro and in vivo"Antiviral Res.. 60. 175-180 (2003)
[Publications] Sato, H., Yamamura, J.et al.: "Superiority of varicella skin test antigen over purified varicella-zoster virus glycoproteins in monitoring booster response to Oka varicella vaccine"Vaccine. 22. 15-20 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

弱毒単純ヘルペスウイルスベクターの神経筋疾患治療への応用のための基礎研究

Principal Investigator

黒川 昌彦 富山医科薬科大学, 医学部, 助教授 (80186527)

Research Products

[Publications] Kurokawa, M., Brown, J., Kagawa, Y., Shirak,.K.: "Cytokine-regulatory activity and therapeutic efficacy of cinnamyl derivatives in endotoxin shock"Eur.J.Pharm.. 474. 283-293 (2003)

[Publications] Okuda, T., Kurokawa, M.et al.: "Suppression of generation and replication of acyclovir-resistant herpes simplex virus by a sensitive virus"J.Med.Virol.. 72. 112-120 (2004)

[Publications] Fukuda, Y., Yamamura, J.et al.: "Regulated transgene delivery by ganciclovir in the brain without physiological alterations by a live attenuated herpes simplex virus vector"Neurroscience Res.. 45. 233-241 (2003)

[Publications] Phumiamorn, S., Sato, H.et al.: "Induction of humoral and cell-mediated immunity to hepatitis B surface antigen by a novel aduvant activity of Oka varicella vaccine"J.Gen.Virol.. 84. 287-291 (2003)

[Publications] Lipipun V., Kurokawa M.et al.: "Efficacy of Thai medicinal plant extracts against herpes simplex virus type 1 infection in vitro and in vivo"Antiviral Res.. 60. 175-180 (2003)

[Publications] Sato, H., Yamamura, J.et al.: "Superiority of varicella skin test antigen over purified varicella-zoster virus glycoproteins in monitoring booster response to Oka varicella vaccine"Vaccine. 22. 15-20 (2003)

黒川昌彦富山医科薬科大学, 医学部, 助教授 (80186527)