2003 Fiscal Year Annual Research Report

温熱誘発アポトーシスにおける活性酸素情報伝達の分子機構

Research Project

Project/Area Number	14580565
Research Institution	TOYAMA MEDICAL AND PHARMACEUTICAL UNIVERSITY
Principal Investigator	近藤隆富山医科薬科大学, 医学部, 教授 (40143937)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	田渕圭章富山医科薬科大学, 生命科学実験センター, 助手 (20322109) 張ちん利富山医科薬科大学, 医学部, 教務職員 (90313593) 小川良平富山医科薬科大学, 医学部, 講師 (60334736)
Keywords	ハイパーサーシア / 温熱 / 活性酵素 / アポトーシス / 6-ホルミルプテリン / シグナル伝達
Research Abstract	6-ホルミルプテリン(6-FP)は痛組織から分泌される葉酸代謝物質であり,細胞内でスーパーオキサイドを消去して過酸化水素を生成し,生体防御に関与することが報告されている.フローサイトメータにより,細胞内過酸化水素の生成を測定したところ,6-FP単独処理およびX線照射により増加し,両者の併用でさらに増加した。さらにアポトーシス誘導について検封したところ,6-FPは細胞毒性を示さない渡度で放射線アポトーシスを増強した.そこで,これらの知見を踏まえて,温熱によるアポトーシスに関する細胞内過酸化水素生成の影響を調べ,6-FPの温熱増感剤としての可能性を検討した. ヒトリンパ腫細胞株U937細胞を用いて,6-FP存在下で温熱処理し,6時間後のアポトーシス指標(DMA断片化,形態学変化,細胞内過酸化物質の生成,ホスファチジルセリンの細胞外膜発現,ミトコンドリアの膜電位の低下,カスペースの活性化,シトクロムCの遊離および細胞内Ca^<2+>濃度)について調べた. 形態学的観察の結果,6-FP併用温熱処理でクロマチン凝集や核断片化が促進された.DNA断片化率は温熱単独処理に対し,6-FP併用処理で約30%増強された.PI/AnnexinV-FITC陽性細胞は温熱単独処理で10%であるのに対し,6-FP併用温熱処理で20%に増強された.ミトコンドリア膜電位の低下とカスパーゼ-3の活性化が,温熱単独処理に比べて6-FP併用処理により増強された.細胞内Ca^<2+>濃度は温熱単独処理により増加し,6-FP併用処理によりさらに増加した.細胞増殖も6-FP併用処理で抑制された.また,ウエスタンの結果としては,Bax,Bcl-2,Bcl-xlの発現レベルが不変であること,BidおよびHSP70の発現レベルが6-FPと温熱の併用により抑制されること,6-FPと温熱の併用によりPKCδのミトコンドリアへの移行が促進されることが判明した.

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Li F-J., et al.: "A lipophilic free radical initiator, 2,2´-azobis (2,4-dimethylvaleronitrile) (AMVN) enhances caspase-dependent apoptosis induced by hyperthermia"Int.J.Hyperthermia. 19. 165-177 (2003)
[Publications] Yuki H., et al.: "A free radical initiator, 2,2´-azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride enhances hyperterhmia-induced apoptosis in human uterine cervical cancer cell lines"Free Radic.Res.. 37. 631-643 (2003)
[Publications] Tabuchi Y., et al.: "cDNA microarray analysis reveals chop-10 plays a key role in Sertoli cell injury induced by bisphenol A"Biochem.Biphys.Res.Commun.. 305. 54-61 (2003)
[Publications] Nozaki T., et al.: "Enhancement of ultrasound-mediated gene transfection by membrane modification"J.Gene Med.. 5. 1046-1055 (2003)
[Publications] Feril Jr.L.B., et al.: "Ultrasound-induced killing of monocytic U937 enhanced by 2,2´ azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride"Cancer Sci.. (in press).
[Publications] Cui Z-G., et al.: "Enhancement of radiation-induced apoptosis by 6-formylpterin"Free Radic.Res.. (in press).
[Publications] 近藤隆他: "腎とフリーラジカル第6集"東京医学社. 6 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

温熱誘発アポトーシスにおける活性酸素情報伝達の分子機構

Principal Investigator

近藤 隆 富山医科薬科大学, 医学部, 教授 (40143937)

Research Products

[Publications] Li F-J., et al.: "A lipophilic free radical initiator, 2,2´-azobis (2,4-dimethylvaleronitrile) (AMVN) enhances caspase-dependent apoptosis induced by hyperthermia"Int.J.Hyperthermia. 19. 165-177 (2003)

[Publications] Yuki H., et al.: "A free radical initiator, 2,2´-azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride enhances hyperterhmia-induced apoptosis in human uterine cervical cancer cell lines"Free Radic.Res.. 37. 631-643 (2003)

[Publications] Tabuchi Y., et al.: "cDNA microarray analysis reveals chop-10 plays a key role in Sertoli cell injury induced by bisphenol A"Biochem.Biphys.Res.Commun.. 305. 54-61 (2003)

[Publications] Nozaki T., et al.: "Enhancement of ultrasound-mediated gene transfection by membrane modification"J.Gene Med.. 5. 1046-1055 (2003)

[Publications] Feril Jr.L.B., et al.: "Ultrasound-induced killing of monocytic U937 enhanced by 2,2´ azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride"Cancer Sci.. (in press).

[Publications] Cui Z-G., et al.: "Enhancement of radiation-induced apoptosis by 6-formylpterin"Free Radic.Res.. (in press).

[Publications] 近藤 隆 他: "腎とフリーラジカル第6集"東京医学社. 6 (2003)

近藤隆富山医科薬科大学, 医学部, 教授 (40143937)

[Publications] 近藤隆他: "腎とフリーラジカル第6集"東京医学社. 6 (2003)