骨形成促進遺伝子の発現を活性化させる天然医薬資源の開発研究

2004 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14580618
• Research Institution: TOKYO UNIVERSITY OF SCIENCE
• Principal Investigator: 袴塚 高志 東京理科大学, 薬学部, 講師 (60221488)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 木下 武司 帝京大学, 薬学部, 助教授 (10107386)
• Keywords: 骨代謝 / 骨芽細胞 / 破骨細胞 / 南西諸島 / 薬用植物 / フラボノイド

Research Abstract

骨代謝は骨形成を司る骨芽細胞と骨吸収を司る破骨細胞のバランスの上に成り立っている。骨芽細胞の分化成熟を調節する因子としてPEBP2αA/CBFa1が知られている。また、破骨細胞の分化成熟を調節する因子として骨芽細胞由来のRANKL/ODF及びOPG/OCIFが知られている。本研究の目的は、これら骨代謝のメカニズムに立脚したバイオアッセイ法を駆使して、ヒトの骨形成促進に著効を示すシード化合物を天然資源より探索することである。発見した化合物は骨疾患治療薬のリード化合物としての可能性と、骨代謝に関わる細胞内情報伝達系解析のツールとしての有用性を持っている。探索の対象となる天然資源は、共同研究者木下が沖縄県西表島などの南西諸島において採集した植物である。平成14年度の調査研究において採集した南西諸島産植物についてメタノール抽出エキスを調製し、マウス骨芽細胞株MC3T3-E1に投与した。6時間培養した後に収穫し、PEBP2αA/CBFa1とRANKL/ODF及びOPG/OCIFの遺伝子発現の変動度を測定した。その結果、ハドノキ幹にPEBP2αA/CBFa1遺伝子発現増強活性が、アオガンピ葉にOPG/OCIF遺伝子発現増強活性が検出された。また、ヒトT細胞株Jurkatにも同様な処理を施し、Interleukin-2 (IL-2)の遺伝子発現に対する影響を調べた。250種類の植物エキスのうち、11種類にIL-2遺伝子発現増強作用が見出された。このうち、シャリンバイ幹をメタノールで大量に抽出し、シリカゲルカラムクロマトによる分離を繰り返して最終的にIL-2遺伝子発現を増強する赤色化合物を単離し、各種機器分析によりフラボノイドの一種と同定した。