2002 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
14580638
|
|---|
| Research Institution | Hokkaido University |
|---|
Principal Investigator |
島 礼 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 助教授 (10196462)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田沼 延公 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 助手 (40333645)
菊池 九二三 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 教授 (20006117)
|
|---|
| Keywords | S6キナーゼ / PP1 / MAPK / raf / Aurora kinase / gsk3b / 細胞増殖 / リン酸化 |
|---|
| Research Abstract |
細胞増殖には細胞分裂に伴う構成タンパク質の増産が必須である。現在翻訳のスイッチと考えられているのが、S6タンパクであり、S6キナーゼの活性化によりS6タンパクがリン酸化されONになり、セリン/スレオニンホスファターゼ1型(PP1)により脱リン酸化されOFFになると考えられている。
今回PP1について焦点を絞り、細胞増殖に関わるシグナル伝達におけるPP1の機能を明らかにした。
(1)セリン/スレオニンホスファターゼ1型(PP1)特異的阻害剤の発見:我々は、トートマイセチン/TCを培養細胞の培地に加えた場合PP1活性のみが特異的に抑制されることを明らかにした。この方法により細胞内PP1の機能の解明が可能になった。
(2)PP1によるMAPKシグナルの制御:上記の発見により、TCを用いてPP1のMAPK経路への関与を解明した。TCは3種類のMAPK経路のうち、JNKとp38には全く影響を与えなかったが、raf/MEK/ERK経路の活性化を特異的に阻害した。この結果に基づき、PP1の触媒サブユニットを細胞内に発現させた。PP1の触媒サブユニットがrafと結合すること、PP1のホスファターゼ活性がrafの活性化に働くことが明らかとなった。
(3)PP1によるAurora kinaseの制御:Aurora kinaseはM期において、中心体の分裂、紡錘体の形成、染色体の分裂などの制御因子と考えられている、その負の制御にPP1が働いている可能性を示した。
(4)PP1とgsk3bの複合体形成:PP1とPP1の制御因子であるインヒビター2(l-2)の複合体に対してさらにgsk3bが結合し、l-2のT72をリン酸化することを示した。細胞内における、gsk3bによるPP1の機能の制御機構について明らかにした。
|
Research Products
(7 results)
-
[Publications] Sugiyama Keiichi: "Aurora-B associated protein phosphatases as negative regulators of kinase activation"Oncogene. 21(20). 3103-3111 (2002)
-
[Publications] Horiguchi Takashi: "Transient forebrain ischemia induces expression of serine/threonine protein phosphatase 1 mRNA in the vulnerable regions of gerbil brain"Neuroscience Lett.. 325(2). 115-118 (2002)
-
[Publications] Nakamura Koji: "A novel low-molecular-mass dual-specificity phosphatase, LDP-2, with a naturally occurring substitution that affects substrate specificity"J. Biochem.. 132(3). 463-470 (2002)
-
[Publications] Okochi Eriko: "Reduced Brca1 protein expression in 2-amino-1 -methl-6-phenylimidazo[45-b]pyridine induced rat mammary carcinomas"Mol. Carcinog.. 34(4). 211-218 (2002)
-
[Publications] Mitsuhashi Shinya: "Usage of Tautomycetin, a novel inhibitor of protein phosphatase 1 (PP1), reveals that PPI is a positive regulator of raf-1 in vivo"J. Biol. Chem.. 278(1). 82-88 (2003)
-
[Publications] Sakashita Gyosuke: "Interaction between phosphatase inhibitor-2 and glycogen synthase-3β in intact cells"J. Biochem.. 133(2). 165-171 (2003)
-
[Publications] Tanuma Nobuhiro: "Reduced tumorigenicity of murine leukemia cells expressing protein-tyrosine phosphatase PTPeC"Oncogene. (印刷中). (2003)
