2003 Fiscal Year Annual Research Report

膜脂質情報変換酵素ホスホリパーゼDの細胞増殖・生存シグナルの制御機構解明

Research Project

Project/Area Number	14580646
Research Institution	GIFU UNIVERSITY
Principal Investigator	坂野喜子岐阜大学, 医学部, 助教授 (50116852)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	野澤義則 (財)岐阜県国際バイオ研究所, 所長兼部長 (10021362) 中島茂岐阜大学, 医学部, 教授 (60188935)
Keywords	ホスホリパーゼD / PI3-キナーゼ / 生存シグナル / Akt / ERK / スフィンゴシン1-リン酸
Research Abstract	ホスホリパーゼD(PLD)は産生されるホスファチジン(PA)を介してさまざまな情報伝達系と活発にクロストークし、重要な情報変換酵素であることが近年明らかにされてきた。高等動物PLDには2種類のアイソザイム(PLD1,2)があり、各種アゴニスト刺激により異なる機構で活性化されることが知られている。PLDの細胞機能(分泌などの迅速応答ならびに長期応答の増殖、分化・アポトーシスなど)における関与について見当を行い、肝再生のS期や肝がん細胞および腎がん組織の核にPLD2の高活性が認められ、またPLD2遺伝子SNP解析によりThr577/Ile多型が大腸がんで高いことが見出され、PLDが増殖やがん化に関与することを示唆した。一方、神経細胞(PC12細胞)の酸化ストレス(H_2O_2)の初期応答として著しいPLDの活性化が起こり、この活性化にアルカリホスファターゼの関与が示唆された。PLDの活性上昇がアポトーシス誘導を制御することが示されており、SurvivalシグナリングにおけるPLDの役割を明らかにするために、PLD1,2の過剰発現細胞を用いて検討した。スフィンゴシン1-リン酸(S1P)受容体S1P3過剰発現CHO細胞にPLD1およびPLD2を過剰発現し、増殖(S1P,IGF)刺激によるPLD、AktおよびERKの活性化を検討したところ、PLD過剰発現によりAktとERKの活性化が増強され、これらの活性化は1-butanolにより阻害された。一方、IGF刺激によるAktの活性化はPLD1,2過剰発現によって影響されないことから、PLDの関与は受容体により異なることが示された。さらに、CHO細胞をアクチノマイシンD(AMD)処理するとアポトーシスが誘導されるが、PLD1,2過剰発現により抑制されることを見いだした。AMDによるアポトーシスシグナルには、カスパーゼ依存的なPKCδの分解が関与し、PLD1,2の過剰発現によりPKCδの分解が抑制された。また、AMDによるERKやS6Kの活性化がPLD1,2導入により増強された。以上の結果から、PLD1,2は増殖・生存シグナリングの活性促進に関与していることが示唆された。また、PLD1,2がmelanogenesisを抑制的に調節することを明らかにした。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Banno, Y. et al.: "Involvement of Phospholipase D in insulin-like growth factor-I-Induced activation of ERK, but not phosphatidylinositol 3-kinase or Akt, in Chinese Hamster ovary cells"Biochem.J.. 369. 363-368 (2003)
[Publications] Yamada Y. et al.: "Association of a polymorphism of the phospholipase D2 gene with the prevalence of colorectal cancer"J.Mol.Med.. 81. 126-131 (2003)
[Publications] Banno, Y., Nozawa, Y.: "Hydrogen peroxide-induced phospholipae D activation and its PKC dependence are modulated by pH changes in PC12 cells"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 312. 1087-1093 (2003)
[Publications] Terada, N. et al.: "Compartmenttation of the mouse cerebellar cortex by sphingosine kinase"J.Comp.Neurol.. 469. 119-127 (2004)
[Publications] Ohguchi, K. et al.: "Involvement of Phospholipase D1 in Melanogenesis of Mouse B16 Melanoma Cells"J.Biol.Cherm.. 279. 3408-3412 (2004)
[Publications] Yamada, M. et al.: "Overexpression of phospholipase D prevents Ach D-induced apoptosls through potentiation of PI 3-klnase signaling pathways in Chinese hamater ovary cells"Biochem.J.. 378. 649-656 (2004)
[Publications] 坂野喜子, 野澤義則: "生物薬学実験講座"目本薬学会(印刷中). (2004)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

膜脂質情報変換酵素ホスホリパーゼDの細胞増殖・生存シグナルの制御機構解明

Principal Investigator

坂野 喜子 岐阜大学, 医学部, 助教授 (50116852)

Research Products

[Publications] Banno, Y. et al.: "Involvement of Phospholipase D in insulin-like growth factor-I-Induced activation of ERK, but not phosphatidylinositol 3-kinase or Akt, in Chinese Hamster ovary cells"Biochem.J.. 369. 363-368 (2003)

[Publications] Yamada Y. et al.: "Association of a polymorphism of the phospholipase D2 gene with the prevalence of colorectal cancer"J.Mol.Med.. 81. 126-131 (2003)

[Publications] Banno, Y., Nozawa, Y.: "Hydrogen peroxide-induced phospholipae D activation and its PKC dependence are modulated by pH changes in PC12 cells"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 312. 1087-1093 (2003)

[Publications] Terada, N. et al.: "Compartmenttation of the mouse cerebellar cortex by sphingosine kinase"J.Comp.Neurol.. 469. 119-127 (2004)

[Publications] Ohguchi, K. et al.: "Involvement of Phospholipase D1 in Melanogenesis of Mouse B16 Melanoma Cells"J.Biol.Cherm.. 279. 3408-3412 (2004)

[Publications] Yamada, M. et al.: "Overexpression of phospholipase D prevents Ach D-induced apoptosls through potentiation of PI 3-klnase signaling pathways in Chinese hamater ovary cells"Biochem.J.. 378. 649-656 (2004)

[Publications] 坂野喜子, 野澤義則: "生物薬学実験講座"目本薬学会(印刷中). (2004)

坂野喜子岐阜大学, 医学部, 助教授 (50116852)