2002 Fiscal Year Annual Research Report

膜1回貫通型メタロプロテアーゼであるマウスADAM33の機能に関する研究

Research Project

Project/Area Number	14580751
Research Institution	Fujita Health University
Principal Investigator	澤田浩秀藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 助手 (30247663)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	石黒啓司藤田保健衛生大学, 疾患モデル教育研究センター, 助教授 (20211039)
Keywords	ADAM遺伝子 / 膜1貫通型 / メタロプロテアーゼ / トランスジェニックマウス / 喘息 / 連鎖解析
Research Abstract	本研究は我々のグループが新規に単離、解析した膜1回貫通型メタロプロテアーゼ、ADAM33の機能解析を行い、生理的な機能を明らかにすることにある。そのために、細胞生物学的な応用を考えて、ADAM33遺伝子の高発現遺伝子導入マウス(トランスジェニックマウス)の作製を進めてきた。導入コンストラクトは、サイトメガロウイルスの最小単位プロモーターにloxP配列で挟まれたクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)があり(PCMV/lox/CAT/lox/PAvector)、その下流にADAM33遺伝子を構築した。この遺伝子を1本鎖に切断して、マウス導入遺伝子を作製した。ADAM33遺伝子cDNA(2.8Kb)の構築した遺伝子をマウスの受精卵に注入して遺伝子導入マウスの作製を行った。5回の注入で合計103匹のマウスが生まれた。これらのマウスの尾からゲノムDNAを抽出し、遺伝子型をサザンブロット法で解析したことろ3匹がADAM33遺伝子陽性で、かつCAT遺伝子陽性であった。その3匹を野生型のマウスを交配して継代を行っているが、そのうちの1匹は不妊で子孫を得ることが不可能であった。他の2匹は子孫を得ることが出来、そのうち1匹ずつを用いて発現量を確認するためにCAT蛋白質に対するEIA法を行ったところ2匹ともに遺伝子は継代できていなかった。そこで、再度同一の実験を行い5匹のADAM33遺伝子とCAT遺伝子導入マウスを得ることができた。 ADAM33はアイスランド人約30万人の遺伝子連鎖解析から、喘息の原因遺伝子と考えられており今後の研究が興味深い。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Ishiguri H. 他13名: "Age-dependent and tissue-specific CAG repeat instability occurs in mouse knock-in for a mutant Huntington's diseasegene"J.Neurosci.Res.. 65. 289-297 (2001)
[Publications] 石黒啓司: "ハンチントン病モデル動物による神経変性疾患研究の現状"脳と神経. 53. 829-837 (2001)
[Publications] Yoshinaka T. 他7名: "Identification and characterization of novel mouse and human ADAM33s with potential metalloprotease activity"Gene. 282. 227-236 (2002)
[Publications] Asakura 他17名: "Cardiac hypertrophy is inhibited by antagonism of ADAM12 processing of HB-EGF : Metalloprotease inhibitors as a potential new therapy for cardiac hypertrophy"Nature Medicine. 8. 35-40 (2002)
[Publications] Ichino 他5名: "Increase of transcriptional levels of egr-1 and nur77 genes due to both nicotine treatment and withdrawal in pheochrormocytoma cells"J.Neural Transmission. 109. 1015-1022 (2002)
[Publications] Ishiguro 他名: "Dopamine neurons are not affected by expanded polyglutamine stretches in HD gene knock-in mice"Advances in Behavioral Biology. 53. 99-102 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

膜1回貫通型メタロプロテアーゼであるマウスADAM33の機能に関する研究

Principal Investigator

澤田 浩秀 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 助手 (30247663)

Research Products

[Publications] Ishiguri H. 他13名: "Age-dependent and tissue-specific CAG repeat instability occurs in mouse knock-in for a mutant Huntington's diseasegene"J.Neurosci.Res.. 65. 289-297 (2001)

[Publications] 石黒啓司: "ハンチントン病モデル動物による神経変性疾患研究の現状"脳と神経. 53. 829-837 (2001)

[Publications] Yoshinaka T. 他7名: "Identification and characterization of novel mouse and human ADAM33s with potential metalloprotease activity"Gene. 282. 227-236 (2002)

[Publications] Asakura 他17名: "Cardiac hypertrophy is inhibited by antagonism of ADAM12 processing of HB-EGF : Metalloprotease inhibitors as a potential new therapy for cardiac hypertrophy"Nature Medicine. 8. 35-40 (2002)

[Publications] Ichino 他5名: "Increase of transcriptional levels of egr-1 and nur77 genes due to both nicotine treatment and withdrawal in pheochrormocytoma cells"J.Neural Transmission. 109. 1015-1022 (2002)

[Publications] Ishiguro 他 名: "Dopamine neurons are not affected by expanded polyglutamine stretches in HD gene knock-in mice"Advances in Behavioral Biology. 53. 99-102 (2002)

澤田浩秀藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 助手 (30247663)

[Publications] Ishiguro 他名: "Dopamine neurons are not affected by expanded polyglutamine stretches in HD gene knock-in mice"Advances in Behavioral Biology. 53. 99-102 (2002)