2003 Fiscal Year Annual Research Report

細胞内寄生菌弱毒株を抗原提示細胞への運搬ベクターとする経口DNAワクチンの開発:健康豚下顎リンパ節から分離されるロドコッカス・エクイ中等度毒力株の応用

Research Project

Project/Area Number	14656124
Research Institution	Kitasato University
Principal Investigator	高井伸二北里大学, 獣医畜産学部, 助教授 (80137900)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	斑目広郎麻布大学, 獣医学部, 助教授 (20173768) 椿志郎北里大学, 獣医畜産学部, 教授 (70050507) 角田勤北里大学, 獣医畜産学部, 講師 (80317057)
Keywords	ロドコッカス・エクイ / 病原性プラスミド / DNAワクチン / 病原性 / 弱毒株 / 細胞内寄生菌 / 豚 / 抗原提示細胞
Research Abstract	細胞内寄生菌弱毒株を用いたDNAワクチン運搬システムは高い安定性、安い生産コスト、投与技術の簡便さの点から、家畜の次世代ワクチンとして極めて有望である。本研究の目的は、免疫応答の場であるリンパ節に寄生するロドコッカス・エクイ中等度毒力株をDNAワクチンの免疫系(樹状細胞)への効率的な運搬ベクターとして利用可能であるか否かを検討し、経口ワクチンとして家畜の次世代ワクチンの可能性を探ることである。平成15年度の研究では、平成14年度に全塩基配列を決定したロドコッカス・エクイの潜在プラスミド2種(以下pK56-1とpK56-2)を用いてロドコッカス・エクイ用のDNAワクチンベクター作製の為に、大腸菌-ロドコッカス・エクイ間のシャトルベクターを構築し、形質転換株を作製した。pK56-1のRep領域を用いたシャトルベクターの構築を行いpRS-1,および-2のシャトルベクターを得た。ついでpRS-1,および-2によるロドコッカス・エクイ・コンピテントセルの形質転換を行った。その結果、クロラムフェニコール耐性の形質転換体が得られたが、プラスミドの再抽出でpRS-1,および-2とも構成している塩基配列が維持されず、ロドコッカス・エクイ内で安定性がなかった。形質転換体より抽出されたプラスミドのシークエンスにより、シャトルベクターの一部と宿主染色体DNAの一部が置換していることから、catのプロモーターが機能していない可能性が考えられた。今後、利用可能な薬剤耐性マーカーの検討が必要となるが、今回得られたシークエンスデータはシャトルベクター構築のための有益な情報を提供するものである。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Takai, S.et al.: "Identification of virulence-associated antigens and plasmids in Rhodococcus equi from AIDS patients and prevalence of virulent R. equi in soil collected from domestic animal farms in Chiang Mai."Am.J.Trop.Med.Hyg.. 66. 52-55 (2002)
[Publications] Yuyama, T., et al.: "Molecular epidemiology of virulent Rhodococcus equi in thoroughbred horses in Kagoshima."J.Vet.Med.Sci.. 64. 715-718 (2002)
[Publications] Makrai L et al.: "Characterization of virulence plasmid types in Rhodococcus equi isolates from foals, pigs, humans and soil in Hungary."Vet.Microbiol.. 88. 377-384 (2002)
[Publications] Takai, S et al.: "Isotype-specific antibody responses to Rhodococcus equi in foals on a horse-breeding farm with a persistent incidence of R. equi infection."J.Equine Sci.. 13. 63-70 (2002)
[Publications] Takai, S et al.: "Virulence of Rhodococcus equi from cats and dogs."J.Clin.Microbiol.. 41. 4468-4470 (2003)
[Publications] Takai, S.et al.: "Rhodococcus equi virulence plasmids recovered from horses and their environment in Jeju, Korea : 90-kb type II and a new variant, 90-kb type V."J.Vet.Med.Sci.. 65. 1313-1317 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

細胞内寄生菌弱毒株を抗原提示細胞への運搬ベクターとする経口DNAワクチンの開発:健康豚下顎リンパ節から分離されるロドコッカス・エクイ中等度毒力株の応用

Principal Investigator

高井 伸二 北里大学, 獣医畜産学部, 助教授 (80137900)

Research Products

[Publications] Takai, S.et al.: "Identification of virulence-associated antigens and plasmids in Rhodococcus equi from AIDS patients and prevalence of virulent R. equi in soil collected from domestic animal farms in Chiang Mai."Am.J.Trop.Med.Hyg.. 66. 52-55 (2002)

[Publications] Yuyama, T., et al.: "Molecular epidemiology of virulent Rhodococcus equi in thoroughbred horses in Kagoshima."J.Vet.Med.Sci.. 64. 715-718 (2002)

[Publications] Makrai L et al.: "Characterization of virulence plasmid types in Rhodococcus equi isolates from foals, pigs, humans and soil in Hungary."Vet.Microbiol.. 88. 377-384 (2002)

[Publications] Takai, S et al.: "Isotype-specific antibody responses to Rhodococcus equi in foals on a horse-breeding farm with a persistent incidence of R. equi infection."J.Equine Sci.. 13. 63-70 (2002)

[Publications] Takai, S et al.: "Virulence of Rhodococcus equi from cats and dogs."J.Clin.Microbiol.. 41. 4468-4470 (2003)

[Publications] Takai, S.et al.: "Rhodococcus equi virulence plasmids recovered from horses and their environment in Jeju, Korea : 90-kb type II and a new variant, 90-kb type V."J.Vet.Med.Sci.. 65. 1313-1317 (2003)

高井伸二北里大学, 獣医畜産学部, 助教授 (80137900)