2002 Fiscal Year Annual Research Report

ES細胞からの樹状細胞分化誘導法とジーントラップ法を用いた樹状細胞機能分子の解析

Research Project

Project/Area Number	14657082
Research Institution	Kumamoto University
Principal Investigator	西村泰治熊本大学, 大学院・医学研究科, 教授 (10156119)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	入江厚熊本大学, 大学院・医学研究科, 助手 (30250343) 千住覚熊本大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (50274709)
Keywords	遺伝子トラップ / ES細胞 / 樹状細胞 / 遺伝子の標的置換 / Cre-Lox / T細胞
Research Abstract	我々は、これまでにマウスES細胞をin vitroにおいて樹状細胞に分化させる方法を開発している。本研究は、この手法を応用して遺伝子トラップES細胞ライブラリーを用いて、樹状細胞において機能発現する遺伝子群を同定すること、および、遺伝子トラップES細胞への遺伝子の標的導入により、任意の遺伝子を樹状細胞において発現する遺伝子座へ挿入し、樹状細胞に分化した後に導入した遺伝子を発現するES細胞クローンを作製することを目的する。遺伝子トラップライブラリーからの樹状細胞発現遺伝子トラップES細胞の同定共同研究者である山村研一博士(熊本大学・発生医学研究センター)らのグループでは、数千種類におよぶ遺伝子トラップES細胞クローンの作製が進められており、その遺伝子トラップES細胞においては、染色体上の様々な遺伝子座にlox配列にはさまれたGeo (LacZ-Neo-R)がマーカー遺伝子として挿入されている。申請者らは、今回、遺伝子トラップES細胞ライブラリーについてCPRG法を用いることにより、ES細胞、樹状細胞およびその途中の各分化段階において効率的にLacZ活性を測定するシステムを開発した。遺伝子トラップES細胞クローンに対するCre-Lox遺伝子置換法を用いた遺伝子導入:上記の方法により、樹状細胞に分化した後に高いレベルでLacZ活性を発現するES細胞クローンを同定した。このES細胞クローンに対し、置換ベクター(p6SEFPPF)およびCre発現ベクター(pCAGGSCre)を用いてOVA(ニワトリ卵白アルブミン)の遺伝子の標的導入を行ない、樹状細胞に分化後にOVA抗原を高発現するES細胞を作製した。さらに、OVA抗原を高発現する樹状細胞が、in vivoおよびin vitroにおいてOVA特異的な細胞傷害性T細胞を感作できることを確認した。

Research Products
(14 results)

All Other

All Publications (14 results)

[Publications] Senju, S.: "Generation and genetic modification of dendritic cells derived from mouse embryonic stem cells"Blood. (in press).
[Publications] Uemura, Y.: "[Review] Specificity, degeneracy, and molecular mimicry in antigen recognition by HLA-class II restricted T cell receptors ; Implications for clinical medicine"Modern Rheumatology. (in press).
[Publications] Irie, A.: "Unique T cell proliferation dependent on PKCm activation with impaired Zap-70 phosphorylation in recognition of over-expressed HLA-DR/partially agonistic peptide complexes"Eur.J.Immunol.. (in press).
[Publications] Soejima, H.: "The preference to a Th1-type response in patients with coronary spastic angina"Circulation. (in press).
[Publications] Uemura, Y.: "Systematic analysis of the combinatorial nature of epitopes recognized by TCR leads to identification of mimicry epitopes for GAD65 specific TCRs"J.Immunol.. 170. 947-960 (2003)
[Publications] Monji, M.: "Head and neck cancer antigens recognized by the humoral immune system"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 294. 734-741 (2002)
[Publications] Nakatsura, T.: "Cellular and Humoral Immune Responses to A Human Pancreatic Cancer Antigen, CLP, Originally Defined by the SEREX Method"Eur.J.Immunol.. 32. 826-836 (2002)
[Publications] Kudo, H.: "Cross-linking HLA-DR molecules on Th1 cells induced anaergy in association with increased level of cyclin-dependent kinase inhibitor p27Kip1"Immunol.Lts. 81. 149-155 (2002)
[Publications] 平田真哉: "HLA-DOによるHLA-DMの制御と抗原提示"臨床免疫. (印刷中).
[Publications] 植村靖史: "HLAと免疫応答"先端医療シリーズ19:アレルギー・リウマチ・膠原病の最新医療、第1章免疫と疾患. 8-15 (2003)
[Publications] 平田真哉: "自己免疫疾患の細胞移入治療:樹状細胞療法の可能性"先端医療シリーズ19:アレルギー・リウマチ・膠原病の最新医療、第7章リウマチ・膠原病の先端的トピックス. 228-233 (2003)
[Publications] 植村靖史: "CLIP置換型インバリアント鎖遺伝子ライブラリーを用いた自己反応性CD4^+T細胞が認識する抗原ペプチドの多様性の解析"臨床免疫. 37・2. 156-164 (2002)
[Publications] 千住覚: "樹状細胞による抗原のプロセシングと提示"医学のあゆみ. 200・6. 467-471 (2002)
[Publications] 中面哲也: "SEREX"Surgery Frontier「第34回臨床免疫の近未来」. 9・3. 58-61 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

ES細胞からの樹状細胞分化誘導法とジーントラップ法を用いた樹状細胞機能分子の解析

Principal Investigator

西村 泰治 熊本大学, 大学院・医学研究科, 教授 (10156119)

Research Products

[Publications] Senju, S.: "Generation and genetic modification of dendritic cells derived from mouse embryonic stem cells"Blood. (in press).

[Publications] Uemura, Y.: "[Review] Specificity, degeneracy, and molecular mimicry in antigen recognition by HLA-class II restricted T cell receptors ; Implications for clinical medicine"Modern Rheumatology. (in press).

[Publications] Irie, A.: "Unique T cell proliferation dependent on PKCm activation with impaired Zap-70 phosphorylation in recognition of over-expressed HLA-DR/partially agonistic peptide complexes"Eur.J.Immunol.. (in press).

[Publications] Soejima, H.: "The preference to a Th1-type response in patients with coronary spastic angina"Circulation. (in press).

[Publications] Uemura, Y.: "Systematic analysis of the combinatorial nature of epitopes recognized by TCR leads to identification of mimicry epitopes for GAD65 specific TCRs"J.Immunol.. 170. 947-960 (2003)

[Publications] Monji, M.: "Head and neck cancer antigens recognized by the humoral immune system"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 294. 734-741 (2002)

[Publications] Nakatsura, T.: "Cellular and Humoral Immune Responses to A Human Pancreatic Cancer Antigen, CLP, Originally Defined by the SEREX Method"Eur.J.Immunol.. 32. 826-836 (2002)

[Publications] Kudo, H.: "Cross-linking HLA-DR molecules on Th1 cells induced anaergy in association with increased level of cyclin-dependent kinase inhibitor p27Kip1"Immunol.Lts. 81. 149-155 (2002)

[Publications] 平田 真哉: "HLA-DOによるHLA-DMの制御と抗原提示"臨床免疫. (印刷中).

[Publications] 植村 靖史: "HLAと免疫応答"先端医療シリーズ19:アレルギー・リウマチ・膠原病の最新医療、第1章免疫と疾患. 8-15 (2003)

[Publications] 平田 真哉: "自己免疫疾患の細胞移入治療:樹状細胞療法の可能性"先端医療シリーズ19:アレルギー・リウマチ・膠原病の最新医療、第7章リウマチ・膠原病の先端的トピックス. 228-233 (2003)

[Publications] 植村 靖史: "CLIP置換型インバリアント鎖遺伝子ライブラリーを用いた自己反応性CD4^+T細胞が認識する抗原ペプチドの多様性の解析"臨床免疫. 37・2. 156-164 (2002)

[Publications] 千住 覚: "樹状細胞による抗原のプロセシングと提示"医学のあゆみ. 200・6. 467-471 (2002)

[Publications] 中面 哲也: "SEREX"Surgery Frontier「第34回臨床免疫の近未来」. 9・3. 58-61 (2002)

西村泰治熊本大学, 大学院・医学研究科, 教授 (10156119)

[Publications] 平田真哉: "HLA-DOによるHLA-DMの制御と抗原提示"臨床免疫. (印刷中).

[Publications] 植村靖史: "HLAと免疫応答"先端医療シリーズ19:アレルギー・リウマチ・膠原病の最新医療、第1章免疫と疾患. 8-15 (2003)

[Publications] 平田真哉: "自己免疫疾患の細胞移入治療:樹状細胞療法の可能性"先端医療シリーズ19:アレルギー・リウマチ・膠原病の最新医療、第7章リウマチ・膠原病の先端的トピックス. 228-233 (2003)

[Publications] 植村靖史: "CLIP置換型インバリアント鎖遺伝子ライブラリーを用いた自己反応性CD4^+T細胞が認識する抗原ペプチドの多様性の解析"臨床免疫. 37・2. 156-164 (2002)

[Publications] 千住覚: "樹状細胞による抗原のプロセシングと提示"医学のあゆみ. 200・6. 467-471 (2002)

[Publications] 中面哲也: "SEREX"Surgery Frontier「第34回臨床免疫の近未来」. 9・3. 58-61 (2002)