2004 Fiscal Year Annual Research Report

治療抵抗性うつ病の病態背景にあるヒト遺伝子多型の系統的探索

Research Project

Project/Area Number	14657235
Research Institution	Showa University
Principal Investigator	上島国利昭和大学, 医学部, 教授 (80051613)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山田光彦国立精神・神経センター, 精神保健研究所, 部長 (60240040)
Keywords	遺伝子多型 / うつ病 / SNP / 難知性 / 治療抵抗性
Research Abstract	これまで我々は、抗うつ薬の奏効機転に関与する機能分子をラット脳より約200種同定した(anti-depressant related gene : ADRG1-200)。なかでも、ADRG#34は、抗うつ薬及び物理的うつ病治療法である電気ケイレン負荷、経頭蓋的磁気刺激負荷においてもその発現が増加することが明らかとなり、うつ病の治癒過程に重要な遺伝子である可能性が考えられた。一方我々は、「うつ病の治療反応性の個人差は、治癒メカニズムに関わる機能分子群の遺伝的多型性に由来する」という作業仮説をもとに検討を進めている。そこで、本研究では、うつ病の治癒過程に重要な遺伝子ADRG#34のヒトホモログ(hADRG#34)における翻訳領域及び転写調節領域に存在する単一遺伝子多型(SNP)の検索を行うことを目的とした。翻訳領域に存在するSNPの検索は、同意が得られた健常成人より血液を採取し、total RNAを抽出した。逆転写反応によりcDNAを合成し、hADRG#34の翻訳領域を4部位(I、II、III、IV)に分け、それぞれ特異的プライマーにより各フラグメントを特異的にPCR増幅する条件を設定した。続いて得られたPCR産物の塩基配列をジデオキシ法により決定・解析し、それぞれのサンプルより得られた配列をアライメントし単一遺伝子多型の検索を行った。その結果、翻訳領域IIIにおいてアミノ酸変異を伴う遺伝子多型候補を発見した。次に、第1エキソン上流3000bpまでの転写調節領域及び翻訳領域に存在するSNPの検索を行った。hADRG#34の染色体座を調べた結果、ゲノム2p11.2に存在することが明らかとなった。続いて、翻訳領域を検索したところSNPは認められなかったが、5' untranslated region上に1カ所のSNPが認められた。次に、第1エキソン上流3000bpまでの転写調節領域におけるSNPを検索した結果、10カ所のSNPが認められた。本研究は、遺伝子試料提供者の人権を擁護するためのガイドラインに準拠し「昭和大学医学部医の倫理委員会」の承認を受けている。