IL-1αアンチセンス遺伝子導入を用いた膵癌転移機序の解明

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14657310
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 真辺 忠夫 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 教授 (80127141)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岡田 祐二 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助手 (10305550) ; 田中 守嗣 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 講師 (10227184) ; 赤毛 義実 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (90264720) ; 山本 稔 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助手 (70347417) ; 沢井 博純 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助手 (40336681)
• Keywords: IL-1α / 膵癌細胞株 / 肝転移 / NFκB

Research Abstract

【方法】
1.SW1990の肝転移能に対するアンチセイスIL-1αDNAの効果(経脾肝転移モデル)
IL-1αのcoding regionに対するアンチセンスIL-1α cDNAを発現ベクターpIRES neoに挿入し、ヒト膵癌細胞株SW1990にリン酸カルシウム法にて遺伝子導入し、形質転換し、IL-1α非発現株を株化した。5週齢雄性ヌードマウスを用い、経脾肝転移モデルにて肝転移能を評価した。
2.膵癌細胞株の転移能とNFκBの関連性について(NFκB gel shift assay)
各細胞(BxPc-3,SW1990,Capan-2,Mia-PaCa-2,IL-1Ra treated cells, Mock vector transfected SW1990,IL-1α Antisense cDNA transfected SW1990)から核蛋白を抽出し、NFκB gel shift assayを施行した.
【結果】
1.IL-1αアンチセンス導入群では肝転移は認められなかった。
2.肝転移能を有するBxPc-3,SW1990にてNFκBの核内移行が認められ、NFκBの活性化が認められたが、非転移株のCapan-2、MiaPaCa-2では認められなかった。IL-1Ra、Antisense導入にてIL-1αを抑制したが、NFκBの活性に変化は認められなかった。