金属アレルギー発症における細胞内イオン取り込みの患者固有傾向識別法確立への試み

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14657499
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 濱野 英也 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (30280986)
• Keywords: 歯科金属 / 金属アレルギー / 金属イオン / 培養細胞 / 溶出

Research Abstract

歯科医療で使用されている補綴修復物合金に含有される金属元素が原因と考えられるアレルギー疾患等の障害が頻繁に報告されるようになり,生体にとって従来ほぼ無為害性とされてきた歯科金属でも状況により注意を払う必要がでてきている。歯科金属に含有される元素の溶出から生体への影響までを,医療従事者として詳細に把握し,歯科材料による為害性の可能性のある各症例については,的確に対応できる体制作りが望まれるようになってきている。本研究は各金属イオンが存在する環境下での各種培養細胞への金属イオンの取り込みとDNAレベルでの障害,機能性タンパクならびに遺伝子発現の様相,および細胞の損傷,回復,死滅に与える影響について検索し,アレルギー反応とのデータを蓄積することにより細胞のイオン取り込み傾向や付随する要因より,アレルギー反応を予測し,診断や治療に役立てる手がかりを得ることが本研究の目的である。細胞内各種タンパク質の同定などに用いるゲル電機泳動システムを使用し,培養細胞にアレルゲン性の高いコバルト,ニッケル,クロム,水銀イオンを選択して投与,さらにDNAマイクロアレイスキャン蛍光検出装置により遺伝子解析を行うべく,本年度においては,従来の実験に加えて新たにチタン,カドミウム等の生体親和性の明らかに異なる金属イオンと培養細胞の種類を追加しながら検索を行っている。特に細胞内の取り込み物質の分布と動態にも重点をおき,現有するSEMと微量金属測定装置により細胞内金属の局在およびイオン濃度と細胞分画法による金属イオンの存在を確認し,細胞内機能分子との相互作用についても検討を加えている。最終年度にあたる次年度は,研究を発展的にまとめるべく,電気泳動法により各種タンパク発現の様相も検索し,PCRでDNAを増幅,免疫に関連する既知遺伝子を整列固定化した既製のDNAチップを用いて,標的を決定していく予定である。