2002 Fiscal Year Annual Research Report

仮骨延長時の顔面骨骨膜における骨系細胞動員ならびに分化誘導に関する研究

Research Project

Project/Area Number	14657536
Research Institution	Tsurumi University
Principal Investigator	中島敏文鶴見大学, 歯学部, 助手 (10339814)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	高垣裕子神奈川歯科大学, 歯学部, 助教授 (60050689) 近藤壽郎鶴見大学, 歯学部, 助教授 (70178416) 関谷秀樹鶴見大学, 歯学部, 助手 (70267540) 瀬戸かん一鶴見大学, 歯学部, 教授 (60064367)
Keywords	機械的刺激 / 伸展刺激 / low-intensity pulsed ultrasound(LIPUS) / osteocyte / 仮骨延長術 / primary cell culture / osteoblast / human facial bone
Research Abstract	1、マウス頭蓋冠骨膜細胞の単離と培養生後4日後のddYマウスを用いて、マウス頭蓋冠骨膜採取、24時間のインキュベーションの後、上清を生食にて洗浄、底に接着した細胞を使用した。これを3週間培養し70%コンフルエントになったところで、0.25mMのアスコルビン酸またはDexamethasone(1x10^<-8>M from a 1-M stock solution in ethanol)を加え、その後実験に使用した。生化学的な試料のばらつきはほとんど問題にならない事が確認されている。 2、未分化骨膜細胞に対する機械的外力の負荷機械的外力はフレクサーセル社製の細胞伸張装置(神奈川歯科大学に設置されている)を用い(Endocrinology vol.137及びB. B. R. C. vol.264)、培養皿の底のコラーゲンコートしたシリコン膜の上に細胞を移し、接着培養する独自の方法を採っている。伸張刺激の強度は、細胞の等倍延長を1E(ストレイン)として、0.4%の延長すなわち4000μEとした。負荷後の時系列的な変化を観察する。また様々な負荷周期と強度による応答の差についても検討する予定である。また、帝人社製低出力超音波パルス装置(図3:神奈川歯科大学に設置されている)を用い(B. B. R. C. vol.268)、20分間超音波刺激を与え、刺激前、刺激開始後15分、6時間、24時間後の細胞の応答を観察する。 3、未分化骨膜細胞に対して機械的外力が及ぼす影響の検討骨系細胞が機械的外力の負荷された状態で示す増殖、基質合成や石灰化の変化は、既に報告した方法(J. Bone Miner. Res. vol.10及びCalcif. Tissue Int. vol.57)で基本的には調べる。しかし本研究は対象が未分化な骨膜細胞である故、分化の方向性を検討する必要がある。今回はDNAチップを用いた発現遺伝子の検出のまえに、骨系のマーカーを用いて、RT-PCRをおこなった結果、COX-2の上昇がみられ、また、ALPも軽度に上昇したことから、骨膜細胞から骨芽細胞への分化にCOX-2が関与していることが示唆された。

Research Products

(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] Toshiroh Kondou et al.: "Sliding distraction osteogenesis of an alveolar fragment containing unerupted tooth in the mandible"Int. J. Oral Maxillofac. Surg.. 31. 675-676 (2002)
[Publications] Kouji Naruse, Y.Mikuni-Takagaki et al.: "Distinct anabolic response of osteoblast to low-intensity pulsed ultrasound"J. Bone Miner. Res.. 18(2). 360-369 (2003)
[Publications] Y.Mikuni-Takagaki et al.: "The role of calcium channels in osteocyte function"J. Musculoskel Neuron Interact. 2(3). 255-258 (2002)
[Publications] Y.Mikuni-Takagaki et al.: "Bone Formation Induced by Pulsed Ultrasound"Bulletin Kanagawa Dental College. 30. 5-8 (2002)
[Publications] 高垣裕子: "骨形成の力学的要因-骨芽細胞の分化・局在に伴う応答のバリエーションと細胞間共同作用-"日本骨形態計測学会雑誌. 12. 23-29 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

仮骨延長時の顔面骨骨膜における骨系細胞動員ならびに分化誘導に関する研究

Principal Investigator

中島 敏文 鶴見大学, 歯学部, 助手 (10339814)

Research Products

[Publications] Toshiroh Kondou et al.: "Sliding distraction osteogenesis of an alveolar fragment containing unerupted tooth in the mandible"Int. J. Oral Maxillofac. Surg.. 31. 675-676 (2002)

[Publications] Kouji Naruse, Y.Mikuni-Takagaki et al.: "Distinct anabolic response of osteoblast to low-intensity pulsed ultrasound"J. Bone Miner. Res.. 18(2). 360-369 (2003)

[Publications] Y.Mikuni-Takagaki et al.: "The role of calcium channels in osteocyte function"J. Musculoskel Neuron Interact. 2(3). 255-258 (2002)

[Publications] Y.Mikuni-Takagaki et al.: "Bone Formation Induced by Pulsed Ultrasound"Bulletin Kanagawa Dental College. 30. 5-8 (2002)

[Publications] 高垣裕子: "骨形成の力学的要因-骨芽細胞の分化・局在に伴う応答のバリエーションと細胞間共同作用-"日本骨形態計測学会雑誌. 12. 23-29 (2002)

中島敏文鶴見大学, 歯学部, 助手 (10339814)