2002 Fiscal Year Annual Research Report
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14760073
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| Research Institution | Akita Prefectural University |
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Principal Investigator |
花井 秀俊 秋田県立大学, 生物資源科学部, 助手 (60336443)
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| Keywords | イネ / 籾殻 / 種子根 / 初期生育 |
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| Research Abstract |
申請者は、イネの初期生育において籾殻に存在する生育促進因子が重要な役割を果たしていることを見出した。本年度の研究では、本因子の化学的性質を調査するとともに、籾殻より本因子を単離するための効率的な精製法を検討した。溶媒転溶試験から本因子は水溶性物質であることが明らかとなった。また各種ゲル濾過クロマトグラフィーの結果から、本因子の分子量は1500から1000程度であり、比較的低分子の化合物であることが示唆された。さらに、陽イオン交換担体であるSP Sephadex C-25カラムによる分離では吸着画分のみに,陰イオン交換担体であるDEAE Sephadex A-25カラムによる分離では非吸着画分と吸着画分に生育促進活性が確認された。この結果から、本因子は分子内に塩基性官能基のみを有する化合物と、酸性官能基と塩基性官能基の双方を有する化合物からなる可能性が示唆された。
以上の結果を基に、本因子の精製法を検討した。籾殻を機械的に粉砕した後、脂溶性成分を除去するためにメタノールに浸漬した。浸漬処理した籾殻をろ過し、精製水に浸漬した。得られた水抽出液を濃縮後、DEAE Sephadex A-25カラムに通液し、分離を行った。生物検定により非吸着画分と100mMギ酸画分に生育促進活性を確認した。これらの活性画分を濃縮・凍結乾燥後、それぞれCellulofine GCL-25カラムによるゲル濾過クロマトグラフィーで精製を行った。活性画分をさらに濃縮・凍結乾燥後、Sephadex G-15またはG-25カラムにてそれぞれ精製を行い活性画分を得た。今後はこれらの画分を逆相HPLCによって精製して本因子の単離法を確立するとともに、精製スケールを拡大して構造決定に必要な活性物質を得る予定である。さらに構造決定を達成した後には本因子の特異的受容体の探索を行う予定である。
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