2003 Fiscal Year Annual Research Report

家禽卵黄膜ZPCタンパクの繊維形成及び精子レセプター活性の制御機構

Research Project

Project/Area Number	14760177
Research Institution	Shizuoka University
Principal Investigator	笹浪知宏静岡大学, 農学部, 助手 (80322139)
Keywords	卵外被 / 卵黄膜 / ZPC / ZP1 / 繊維形成 / 受精 / ウズラ
Research Abstract	ZPCは鳥類の卵黄膜を構成するタンパクのひとつで,輔乳類の透明帯のZPCと相同なタンパクである。家禽の卵黄膜の繊維形成機構と生理機能をあきらかにするために,ZPCの不溶化機構を調べ,以下の結果を得た。卵黄膜を[^3H]標識ZPCとインキュベートしたところ,不溶性画分に放射活性が検出され,さらに,この不溶性画分を泳動し,オートラジオグラフィーで検出したところZPCのバンドが検出された。つまりZPCは卵黄膜と接触すると,不溶性に変化し,卵黄膜に取り込まれることを見い出した。 2.卵黄膜の可溶化物を転写膜に固定化し,[^3H]標識ZPCを用いたリガンドブロット法で検出したところ,内層のもうひとつの構成タンパクであるZP1と特異的に結合することを発見した。また,[^3H]標識ZPCと卵黄膜の可溶化物をインキュベートし,抗ZPC抗体を用いた免疫沈降法を行なったところ,抗ZPC抗体によりZP1がZPCと共沈することがわかった。以上の結果からZPCは卵黄膜のZP1との結合を介して内層に取り込まれ,不溶化することが判明した。 3.ZP1の発現組織を同定するために,特異的プライマーを設計しRT-PCR法でスクリーニングしたところ,ZP1は肝臓で発現していることを発見した。ついで,遺伝子の塩基配列を決定し,特異的抗体を作成し,これらをプローブとして生合成機構を調べたところZP1は女性ホルモンによって合成を刺激されることを発見した。 4.ZPCとZP1との結合特性を調べる実験を行なったところ,この結合は,イオン強度,pHによる影響を大きく受けることを見い出した。つまり,両タンパクはイオン結合により特異的に結合することが判明した。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Sasanami, T.: "Asparagine-linked oligosaccharide-independent secretion of egg envelope glycoprotein ZPC of the Japanese quail (Coturnix japonica)."Comparative Biochemistry and Physiology, Part A. 134・3. 631-638 (2003)
[Publications] Sasanami, T.: "Expression of perivitelline membrane glycoprotein ZP1 in the liver of Japanese quail (Coturnix japonica) after in vivo treatment with diethylstilbestrol."Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology. 84・1. 109-116 (2003)
[Publications] Sasanami, T.: "Carboxy-terminal proteplytic processing at a consensus furin cleavage site is a prerequisite event for quail ZPC secretion."Biology of Reproduction. 68・5. 1613-1619 (2003)
[Publications] Sasanami, T.: "Variant of perivitelline memebrane glycoprotein ZPC of Japanese quail (Coturnix japonica) lacking its cytoplasmic tail exhibits the retention in the endoplasmic rericulum of Chinese hamster ovary (CHO-K1) cells."Biology of Reproduction. 69・4. 1401-1407 (2003)
[Publications] Sasanami, T.: "Effect of follicle-stimulating hormone on ZPC protein secretion by quail granulosa layer."Animal Science Journal. 74・3. 217-222 (2003)
[Publications] Pan, J.: "Stimulation of ZPC production by follicle-stimulating hormone in the granulosa cells of Japanese quail (Coturnix japonica)."Journal of Poultry Science. 40・3. 202-211 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

家禽卵黄膜ZPCタンパクの繊維形成及び精子レセプター活性の制御機構

Principal Investigator

笹浪 知宏 静岡大学, 農学部, 助手 (80322139)

Research Products

[Publications] Sasanami, T.: "Asparagine-linked oligosaccharide-independent secretion of egg envelope glycoprotein ZPC of the Japanese quail (Coturnix japonica)."Comparative Biochemistry and Physiology, Part A. 134・3. 631-638 (2003)

[Publications] Sasanami, T.: "Expression of perivitelline membrane glycoprotein ZP1 in the liver of Japanese quail (Coturnix japonica) after in vivo treatment with diethylstilbestrol."Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology. 84・1. 109-116 (2003)

[Publications] Sasanami, T.: "Carboxy-terminal proteplytic processing at a consensus furin cleavage site is a prerequisite event for quail ZPC secretion."Biology of Reproduction. 68・5. 1613-1619 (2003)

[Publications] Sasanami, T.: "Variant of perivitelline memebrane glycoprotein ZPC of Japanese quail (Coturnix japonica) lacking its cytoplasmic tail exhibits the retention in the endoplasmic rericulum of Chinese hamster ovary (CHO-K1) cells."Biology of Reproduction. 69・4. 1401-1407 (2003)

[Publications] Sasanami, T.: "Effect of follicle-stimulating hormone on ZPC protein secretion by quail granulosa layer."Animal Science Journal. 74・3. 217-222 (2003)

[Publications] Pan, J.: "Stimulation of ZPC production by follicle-stimulating hormone in the granulosa cells of Japanese quail (Coturnix japonica)."Journal of Poultry Science. 40・3. 202-211 (2003)

笹浪知宏静岡大学, 農学部, 助手 (80322139)