造血幹細胞及び間葉系幹細胞を用いた腎臓再生法の開発

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14770563
• Research Institution: Jikei University School of Medicine
• Principal Investigator: 横尾 隆 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (70301538)
• Keywords: 遺伝子治療 / 慢性腎不全 / 骨髄幹細胞 / 腎臓再生法

Research Abstract

これまでの我々は抗炎症性サイトカイン遺伝子を導入した造血幹細胞を移植することによる骨髄改変によって、抗炎症性細胞を持続供給させ長期間実験腎炎の改善をもたらすことが可能であることを報告してきた。そこでこのシステムを用い現在研究が進められている腎臓再生因子を腎臓障害部位の腎臓構成細胞の幹細胞(または前駆細胞)を賦活させることが可能となるか検討している。これまで腎臓再生因子として報告されているHGFを強発現するレトロウイルスを作成し、これをマウス骨髄細胞に遠心法を用いて感染させたところ強いHGF蛋白の発現がwestern blot法によって確認された。このためこの遺伝子操作骨髄細胞を先天性腎不全マウスに移植し、障害局所でHGFを発現させ治療効果が認められるか検討している。これまでのところ生後8週にて骨髄改変を行うと治療効果が出る前に高度のネフローゼに陥り、これに伴う先天性腎不全にてマウスが死亡することがわかったため生後4週にて骨髄改変を行っている。HGF導入骨髄改変群ではmock導入群に比して尿細管間質の線維化の程度が明らかに少ないようであり、現在動物数を増やして統計解析を行っている。また尿中アルブミン、血中BUN、クレアチニンの測定組織学的検討などを同時に行っている。さらに昨年ヒト臍帯血由来CD34陽性細胞を造血幹細胞のsourceとして用いることにより患者負担の軽いシステムへの改良に成功しているため、このシステムを用いてHGFの持続投与が可能か検討を開始している。さらにマウス骨髄から得た間葉系幹細胞にLacZ遺伝子をレトロウイルスを用いて導入後移植したところ、10日後には近位尿細管の一部がLacZ陽性であることが確認された。同様の変化は虚血再還流障害を加えると増加するため、現在先天性代謝疾患モデルマウスを用い治療的尿細管再生が可能か検討している。

Research Products

• [Publications] Yokoo T., et al.: "Gene Delivery using human cord blood-derived CD34^+ cells into inflamed glomeruli in NOD/SCID mice"Kidney International. 64. 102-109 (2003)
• [Publications] Yokoo T., et al.: "Stem cell gene therapy for chronic renal failure"Current Gene Therapy. 3. 387-394 (2003)
• [Publications] 横尾 隆, 細谷龍男: "医学と医療の最前線:腎における再生医療。骨髄幹細胞を用いた糸球体腎炎の治療"日本内科学会誌. 92. 149-154 (2003)