2002 Fiscal Year Annual Research Report
上気道アレルギー性炎症の制御に関する免疫分子生物学的検討-IL-15を用いたサイトカインネットワークの修飾による治療戦略の構築-
Project/Area Number |
14770898
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Research Institution | Shimane Medical University |
Principal Investigator |
石光 亮太郎 島根医科大学, 医学部, 助手 (90301291)
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Keywords | Interleukin(IL)-15 / Toll-like receptor(TLR) / NF-κB |
Research Abstract |
気道上皮細胞からのIL-15産生機構について検討した。IL-15のプロモーター領域にはNF-κB結合モチーフが存在し、Interferon response element(IRE)とともに転写に関与していると報告されている(Azimi N, et al. Proc Natl Acad Sci USA. 1998)。NF-κBの活性化を誘導する受容体として、Toll-like receptor(TLR)が挙げられるが、気道における報告はみられない。そこで、TLRの発現およびTLR下流のシグナル伝達機構に注目した。TLRsの発現について、Northern blot法により、TLR2,3,4,5,6,9の発現を遺伝子レベルで解析したところ、上皮細胞においては、TLR2,3,6の発現はみとめたものの、TLR4,9は発現していなかった。細菌の菌体成分のlipidAをligandとするTLR4、lipoproteinをligandとするTLR2に特に注目し、フローサイトメトリーにより蛋白レベルの発現を解析したところ、TLR2の発現は単球と同程度であったが、TLR4の発現はみられなかった。次に、lipoprotein, lipid A刺激によるIL-15の誘導について、Northern blot法で解析したところlipoprotein刺激でのみIL-15RNAの発現増強を確認した。培養上清中の蛋白濃度も同様の結果であった。TLR2依存性を確認するため、抗TLR2抗体を用いて中和実験をおこなったところ、lipoprotein刺激によるIL-15産生が抑制された。Dual-luciferase assayにより、lipoprotein刺激によるNF-κBの活性化が確認された。NF-κB阻害剤であるcurcuminを添加することにより、定量的RT-PCR法にて、lipoprotein刺激によるIL-15特異的mRNAの発現が有意に抑制された。以上の結果から、気道上皮細胞においては、TLR2が優位に発現しており、NF-κB依存性にIL-15産生を誘導していることが明らかとなった。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Hideyuki Kawauchi: "Invasive Aspergillosis In Paranasal Sinus-Case Report-"日本耳鼻咽喉科感染症研究会会誌. (2003)
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[Publications] Ryotaro Ishimitsu: "NKT cells are dispensable in the induction of oral tolerance but are indispensable in the abrogation of oral tolerance by prostaglandin E"Eur. J. Imniunol.. 33. 183-193 (2003)
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[Publications] Hideyuki Kawauchi: "Clinicopathological Characteristics of Invasivetype Aspergillosis in Paranasal Sinuses"Nasal Polyposis. 29-29 (2002)
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[Publications] 石光亮太郎: "IL-15の気道アレルギー性炎症に及ぼす影響についての検討"耳鼻咽喉科免疫アレルギー. 20・2. 14-45 (2002)
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[Publications] 片岡真吾: "アレルギー性鼻炎を合併した難治性副鼻腔炎の治療"耳鼻咽喉科免疫アレルギー. 20・2. 62-65 (2002)
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[Publications] 石光亮太郎: "IL-15強発現によるTcl応答の増強とTh2応答の抑制"耳鼻咽喉科免疫アレルギー. 19・4. 6-14 (2001)
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[Publications] Ryotaro Ishimitsu: "Dichotomous effect of a traditional Japanese medicine, Bu-zhong-yi-qi-tang on allergic asthma in mice"International Immunopharmacology. 1. 857-865 (2001)
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[Publications] Ryotaro Ishimitsu: "Overexpression of IL-15 in vivo enhances Tcl response, which inhibits allergic inflammation in a murine model of asthma"The Journal of Immunology. 166. 1991-2001 (2001)