GFPトランスジェニックマウスを用いたエストロゲンの脳への作用機構の解明

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 14780571
• Research Institution: Kyoto Prefectural University of Medicine
• Principal Investigator: 松田 賢一 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (40315932)
• Keywords: エストロゲン / エストロゲン受容体 / GFP / トランスジェニック / 性ホルモン / 性差 / 生細胞 / 神経内分泌

Research Abstract

エストロゲンは性差のみられる脳の機能発現に重要な働きをしている。また、最近では、記憶、ストレス応答の他、いくつかの疾患との関わりも指摘されている。研究代表者は、マウスエストロゲン受容体(ER)α遺伝子プロモーター(6.0Kb)の下流にEGFP遺伝子cDNAを繋ぐ形のトランスジーンのトランスジェニック(TG)マウスを作成し、エストロゲンの作用に伴い、脳神経細胞にどのような構造的変化がもたらされ、その結果、どのような機能的変化が生じるのかの解明を行っている。作成したTGマウスは視床下部、中隔、分界条床核、扁桃体や線条体など、これまでにERαを発現すると報告されている領域にGFP陽性の神経細胞の分布すること、これらのGFP陽性の細胞は実際にERαを発現していることが確認された。蛍光タンパクGFPは細胞質内を拡散する性質を持つため、神経細胞の形態を観察できるといった利点を持っている。性ホルモンを枯渇することにより、ERα陽性神経細胞の形態が変化するかどうかを、卵巣摘除を行ったTGマウスの脳組織を解析したところ、卵巣摘除を行うとGFP陽性の細胞が増加する脳領域と変化の見られない領域があり、変化の見られた領域では、神経細胞体が小さくなることを明らかにした。さらに、このTGマウスの脳を培養して、ホルモン環境の変化に伴うERα陽性神経細胞の形態・機能の変化を試験管で生きた細胞・組織を用いて解析する系を確立した。これらの結果を2002年度国際神経内分泌学会で発表し注目を集めた。また、研究代表者は2002年度CREST「脳ニューロステロイド作用を攪乱する環境ホルモン」研究会の演者に選考され、以上の成果を発表した。これらの結果については論文として投稿準備中である。

Research Products

• [Publications] K.I.Matsuda: "Colocalization and ligand-dependent discrete distribution of the estrogen receptor (ER)α and ERβ"Molecular Endocrinology. 16. 2215-2230 (2002)
• [Publications] M.Kawata: "Sex hormone receptors and brain cell structure"Clinical Pediatric Endocrinology. 11. 25-30 (2002)
• [Publications] Y.Oshima: "Behavior of graft host cells in underlying sub-chondral bone after transplantation of osteochoudral"Microscopy Research and Technique. 58. 19-24 (2002)