2016 Fiscal Year Annual Research Report
マダニの自然免疫関連膜受容体を標的としたバベシア原虫媒介阻止ワクチンの開発
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14J05872
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
前田 大輝 山口大学, 連合獣医学研究科, 特別研究員(DC1)
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| Project Period (FY) |
2014-04-25 – 2017-03-31
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| Keywords | マダニ / バベシア原虫 / ステージシフト / 人工吸血 / C型レクチン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
昨年度作出した人工吸血系を用いた新規のマダニ－バベシア実験感染モデルにより、バベシア原虫がマダニ飽血後24時間以内にマダニ中腸内において、マダニ体内ステージへのステージシフトを起こしている可能性が強く示唆された。そこで実際にバベシア原虫のマダニ体内へのステージシフトを誘導することを試みた。人工飽血させたフタトゲチマダニ成ダニの中腸内容物を、in vitro培養系B. ovata感染赤血球に添加した後、静置培養を行い、ギムザ染色による原虫の形態観察を行った。その結果、通常のin vitro培養系と異なる形態の原虫が観察され、その形態変化は12時間以内に完了することが分かった。また、原虫細胞骨格蛋白質P29を標的とした間接蛍光抗体法で確認したところ、それらの多様な形態はすべてバベシア原虫そのものであった。以上の結果より、バベシア原虫はマダニ中腸内において飽血後24時間以内にステージシフトを起こしていることを明らかにした。
ここで確立した実験感染モデルを用いて、実際に同定したフタトゲチマダニC型レクチン（HlCLec）とB. ovataの関連性の検証を行った。HlCLec遺伝子をノックダウンしたマダニ（KD群）にB. ovataを人工感染させ、B. ovata β-tubulin遺伝子を標的としたPCR評価系によりバベシア原虫のマダニ体内動態の変化について観察した。その結果、KD群においては、飽血後4日目においてもマダニ中腸内にB. ovata原虫遺伝子が検出されたが、その他の臓器では検出されなかった。従って、HlClecはマダニ中腸内におけるB. ovata原虫の伝播機構に関与している可能性が示唆された。
これらの研究成果は、マダニベクター研究の発展に寄与するものであり、同定した膜受容体とともに新規のバベシア原虫伝播阻止ワクチンの開発へつながる重要な知見であると考えられる。
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| Research Progress Status |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Characterization and antiviral activity of a newly identified defensin-like peptide, HEdefensin, in the hard tick Haemaphysalis longicornis2017
Author(s)
Talactac MR, Yada Y, Yoshii K, Hernandez EP, Kusakisako K, Maeda H, Galay RL, Fujisaki K, Mochizuki M, Tanaka T
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Journal Title
Dev Comp Immunol.
Volume: 68
Pages: 98-107
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Establishment of a novel tick-Babesia experimental infection model2016
Author(s)
Maeda H, Hatta T, Alim MA, Tsubokawa D, Mikami F, Matsubayashi M, Miyoshi T, Umemiya-Shirafuji R, Kawazu S, Igarashi I, Mochizuki M, Tsuji N, Tanaka T
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Journal Title
Sci Rep.
Volume: 6
Pages: 37039
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] 2-Cys peroxiredoxin is required in successful blood-feeding, reproduction, and antioxidant response in the hard tick Haemaphysalis longicornis2016
Author(s)
Kusakisako K, Galay RL, Umemiya-Shirafuji R, Hernandez EP, Maeda H, Talactac MR, Tsuji N, Mochizuki M, Fujisaki K, Tanaka T
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Journal Title
Parasit Vectors
Volume: 9
Pages: 457
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Presentation] フタトゲチマダニヘモリンフ由来ディフェンシンの同定とその抗菌作用2016
Author(s)
屋田 友里花, 草木迫 浩大, Melbourne Rio Talactac, Emmanuel Pacia Hernandez, 前田 大輝, 安藤 匡子, 望月 雅美, 藤崎 幸蔵, 田仲 哲也
Organizer
第69回日本寄生虫学会南日本支部大会・第66回日本衛生動物学会南日本支部大会合同大会
Place of Presentation
佐賀大学（佐賀県佐賀市）
Year and Date
2016-11-05 – 2016-11-06
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[Presentation] マダニの自然免疫とバベシアとともに2016
Author(s)
前田 大輝, 八田 岳士, 坪川 大悟, 三上 房子, 松林 誠, 三好 猛晴, 草木迫 浩大, Remil Linggatong Galay, Melbourne Rio Talactac, 宮田 健, 白藤(梅宮) 梨可, 河津 信一郎, 五十嵐 郁男, 望月 雅美, 藤崎 幸蔵, 辻 尚利, 田仲 哲也
Organizer
第24回分子寄生虫学ワークショップ・第14回分子寄生虫・マラリア研究フォーラム合同大会
Place of Presentation
帯広畜産大学（北海道帯広市）
Year and Date
2016-08-21 – 2016-08-24
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[Presentation] 糞線虫由来ロンギスタチン様分子の性状2016
Author(s)
坪川 大悟, 八田 岳士, 前田 大輝, 三上 房子, 菊地 泰生, 丸山 治彦, 辻 尚利
Organizer
第24回分子寄生虫学ワークショップ・第14回分子寄生虫・マラリア研究フォーラム合同大会
Place of Presentation
帯広畜産大学（北海道帯広市）
Year and Date
2016-08-21 – 2016-08-24
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