2015 Fiscal Year Annual Research Report
植物共生細菌Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｓｐ． Ｂ５１０の感染メカニズムの解析
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14J40133
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| Research Institution | Tokyo University of Agriculture and Technology |
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Principal Investigator |
安田 美智子 東京農工大学, 農学研究院, 特別研究員(RPD)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 植物共生細菌 / Azospirillum sp. B510 / イネ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
イネ葉組織内から単離された細菌Azospirillum sp. B510は、イネに感染・定着することでイネの生長促進および病害抵抗性増強効果を付与することが明らかにされており、本菌の利用は環境低負荷型の農業に非常に有益であることが期待されている。しかしながら、現在までに本菌がどのように宿主であるイネに感染・定着するのかは明らかにされていない。そこで本研究では、分子生物学的な手法を用い、Azospirillum sp. B510の感染・定着に関わる遺伝子を同定し、そのメカニズムを明らかにする。Azopsirillum sp. B510株への遺伝子導入方法のひとつにミニトランスポゾン法がある。トランスポゾンはゲノム上にランダムに挿入されるため、遺伝子欠損型の変異ライブラリを作製することが可能である。本年度は、ミニトランスポゾンであるmTn5にGUS標識遺伝子を結合させたプラスミドを形質転換した大腸菌とAzospirillum sp. B510を接合により形質転換しさせて、Azospirillum sp. B510トランスポゾン挿入遺伝子欠損変異ライブラリを作製し、イネへの定着が出来なくなった株を選抜中である。また、蛍光標識遺伝子を導入したAzospirillum sp. B510を作製し、Azospirillum sp. B510が選択的にイネの組織内に侵入しているのかどうかなど、蛍光顕微鏡を用いてその挙動を観察した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
本年度は、Azospirillum sp. B510の感染定着に関わる因子を明らかにするために、トランスポゾン挿入変異体を作成し、イネへの感染定着が出来なかった株をスクリーニングした。また、Azospirillum sp. B510の感染定着の様子を観察するために、DsRED標識したAzspirillum sp. B510を作成し、イネに感染させ、その様子を観察した。さらに、本菌の定着を植物サンプルを痛めることなく経時的に観察する実験系を構築した。
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| Strategy for Future Research Activity |
本年度は遺伝子欠損変異株を作成し、候補遺伝子がAzospirillum sp. B510の感染・定着に関与しているかどうかを確認する。さらに、遺伝子欠損変異株を実際にイネに感染させて、生育促進効果および病害抵抗性誘導効果に影響するかどうかを検証する。
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[Journal Article] Rhizobium–legume symbiosis in the absence of Nod factors: two possible scenarios with or without the T3SS2016
Author(s)
Okazaki S., Tittabutr P., Teulet A., Thouin J., Fardoux J., Chaintreuil, C. Gully D., Arrighi JF., Furuta N., Miwa H., Yasuda M., Nouwen N., Teaumroong N and Giraud E
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Journal Title
The ISME Journal
Volume: 10
Pages: 64-74
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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