個体・細胞レベルでの放射線応答へのポリ(ADP-リボース)代謝の関与と放射線増感

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15025274
• Research Institution: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• Principal Investigator: 益谷 美都子 国立がんセンター研究所, 生化学部・担がん生体研究室室長 (60238904)
• Keywords: Poly(ADP-ribose) / Parp / Parg / ガンマ線 / apoptosis / NAD

Research Abstract

放射線治療の感受性の予測には未解明の部分が多く、増感法の新たな開発が重要である。放射線によるDNAの修復、及び細胞死の過程についてはDNA-PKやp53、SAPK/JNK経路等について精力的に解明が進みつつある。本研究ではポリ(ADP-リボース)代謝という異なる切り口からポリ(ADP-リボース)合成及び分解の欠損モデルを用いて放射線応答機構や増感法の開発の推進や放射線治療抵抗性の機序の解明を目指し、研究を行った。
ポリ(ADP-リボース)合成酵素(Parp-1)欠損マウスにおけるガンマ線照射後の出血傾向は、脾臓細胞の増殖サイクルへの移行低下に関連する骨髄幹細胞の増殖、分化能の低下による可能性が示唆された。また、Parp-1欠損マウスにおけるガンマ線照射後のapoptosis感受性は、臓器間で異なり、毛嚢では顕著な亢進を認めた。酸化的DNA損傷後、Parp-1欠損細胞では、XRCC1 fociの形成能が消失した。
ポリ(ADP-リボース)グリコヒドロラーゼ(Parg)欠損細胞における、ガンマ線照射後の致死感受性亢進は、NADの減少とpoly(ADP-ribose)の一過性蓄積を伴い、初期のapoptosisではなく、生存細胞におけるより遅延性の影響によることを示した。マウス血漿中のpoly(ADP-ribose)の存在を明らかにし、その定量系を確立した。これにより細胞死に伴い、血中に漏出すると予測されるpoly(ADP ribose)が、放射線治療感受性予測のバイオマーカーとして有用であるかどうかの検討が可能になった。

Research Products

• [Publications] El-Khamisy SF, Masutani M, Suzuki H, Caldecott KW.: "A requirement for PARP-1 for the assembly or stability of XRCC1 nuclear foci at sites of oxidative DNA damage"Nucleic Acids Res.. 31. 5526-5533 (2003)
• [Publications] Masutani M, Nakagama H, Sugimura T.: "Poly(ADP-ribose) and Carcinogenesis"Genes Chromosomes & Cancer. 38. 339-348 (2003)
• [Publications] Watanabe F, Masutani M, Kamada N, Suzuki H, Nakagama H, Sugimura T, Teraoka H.: "Impairment in S-phase entry of splenocytes of Parp-1 knockout mice"Proc.Jpn.Acad.. 79. 248-251 (2003)
• [Publications] Gunji H, Fujihara H, Kamada N, Omura K, Jishage K, Nakagama H, Sugimura T, Masutani M.: "Lack of altered frequency of sister-chromatid exchanges in poly(ADP-ribose) glycohydrolase-deficient mouse ES cells treated with methylmethanesulfonate"Proc.Jpn.Acad.. 79. 305-307 (2003)