2003 Fiscal Year Annual Research Report
クロマチン構造変換因子SWI/SNFによる幹細胞の自己複製制御
Project/Area Number |
15039209
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
箕口 滋 東京大学, 医科学研究所, 助手 (60322757)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊庭 英夫 東京大学, 医科学研究所, 教授 (60111449)
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Keywords | 多能性幹細胞 / 自己複製 / 原始外胚葉 / 細胞分化 / クロマチン / SWI / SNF複合体 / Brm遺伝子 / BRG1遺伝子 |
Research Abstract |
本研究では幹細胞の自己複製や分化制御におけるクロマチン動態の役割を明らかにすることを目的とし、特にクロマチン構造変換因子SWI/SNF複合体の関与について検討している。本年度はまず、SWI/SNF複合体のATPaseサブユニットであるBrm及びBRG1のマウスES細胞における発現制御から明らかにした。RT-PCRの結果から、BRG1は未分化ES細胞で発現が認められ、分化誘導8日目までその量は一定であった。他方、BrmのmRNAは未分化状態では検出できないが、分化誘導後4日目をピークに一過性に誘導されることが判明した。誘導のタイミングは原始外胚葉での発現を示唆しており、その細胞系譜での役割について今後検討を加える予定である。また、未分化ES細胞核を用いたRun-On解析を行った結果、Brmの転写が認められ、転写後の調節によってその発現が調節されている可能性も示唆された。次に、未分化状態の維持とその破綻におけるBrmの役割を調べる目的で、未分化ES細胞へ異所的にBrmの過剰発現を試みた。Brmの過剰発現は細胞増殖を抑制するためか、安定に発現を維持する細胞株を樹立することは困難であるとされてきた。ES細胞の場合も様々な発現系を検討したが、1週間近く発現を雑持し続けることは出来ず、分化実験において明確な結果は得られなかった。この問題を克服するため、RNAi法を用いて内在性Brmをノックダウンした際の原始外胚葉への分化への影響を現在検討している。これによってES細胞の維持調節におけるBrmの役割を明らかにできるものと期待している。
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[Publications] Minoguchi, S. et al.: "Differential control of the NIMA-related kinases, Nek6 and Nek7, by serum stimulation."Biochem Biophys Res Commun.. 301. 899-906 (2003)
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[Publications] Minoguchi, M. et al.: "STAP-2/BKS, an adaptor/docking protein, modulates STAT3 activation in acute-phase response through its YXXQ motif."J Biol Chem.. 278. 11182-11189 (2004)
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[Publications] Joo, A.et al.: "STAT3 and MITF cooperatively induce cellular transformation through upregulation of c-fos expression."Oncogene. 23. 726-734 (2003)
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[Publications] Yamamichi-Nishina, M. et al.: "SW13 cells can transition between two distinct subtypes by switching expression of BRG1 and Brm genes at the post-transcriptional level,"J Biol Chem.. 278. 7422-7430 (2003)
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[Publications] Iba, H.et al.: "SWI/SNF chromatin remodelling complex and retroviral gene silencing."Rev Abed Virol.. 13. 99-110 (2003)
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[Publications] Shimizu, Y. et al.: "Kinetics of v-src-induced epithelial-mesenchymal transition in developing glandular stomach."Oncogene. 22. 884-893 (2003)