2006 Fiscal Year Annual Research Report
植物の機能発現とメンブレントラフィック-酵母研究からの展開
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15079210
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
中野 明彦 東京大学, 大学院理学系研究科, 教授 (90142140)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上田 貴志 東京大学, 大学院理学系研究科, 助教授 (10311333)
東山 哲也 東京大学, 大学院理学系研究科, 助手 (00313205)
森田 美代 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 助教授 (10314535)
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| Keywords | Rab GTPase / エンドサイトーシス / Rab5 / GTP / GDP交換因子 / SNARE / 胚発生 / 液胞 / ゴルジ体 |
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| Research Abstract |
主にシロイヌナズナを材料に用い,次のような研究を行った。
1.シロイヌナズナのRab5 GTPaseには,酵母から動物までよく保存されているタイプのAra7,Rha1と,植物に特異的なAra6がある。Rab5のグアニンヌクレオチド交換因子(GEF)として同定したAtVps9aが,これら2つのタイプのRab5全てについてGEF活性をもつことを示した。また各Rab5との相互作用を生化学的に詳細に解析した。AtVps9aのC末端部分に,Ara6特異的な活性調節機能があることを明らかにした。
2.3つのRab5遺伝子およびAtVPS9aに変異をもつシロイヌナズナ変異体の表現型解析を行った。ARA7とRHA1の二重変異は雄性配偶体致死であることを明らかにした。またAtVPS9aの完全欠損は配偶体致死となったが,損傷の弱いアレルでは,根の成長に異常を示した。この表現型は活性型Ara7の過剰発現あるいはAra6の欠失により相補され,2つのタイプのRab5が拮抗的に働いていることを示した。この拮抗関係は,液胞のSNAREであるAtVAM3との二重変異でもみられ,植物特異的なエンドサイトーシスの制御系の存在が明らかになった。
3.ゴルジ体を可視化したシロイヌナズナを変異原処理し,ゴルジ体形態異常変異体の単離・解析を行った。また,ゴルジ体の異なる槽を異なる蛍光タンパク質で標識し,層板構造の中での挙動を観察した。
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