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2006 Fiscal Year Annual Research Report

真核生物染色体DNA複製開始領域における複製因子集合の分子機構

Research Project

Project/Area Number 15207012
Research InstitutionNational Institute of Genetics

Principal Investigator

荒木 弘之  国立遺伝学研究所, 細胞遺伝研究系, 教授 (20151160)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 田中 誠司  国立遺伝学研究所, 細胞遺伝研究系, 助手 (50263314)
KeywordsDNA複製 / 複製開始 / 複合体形成 / 酵母 / CDK
Research Abstract

真核生物の複製開始領域には、サイクリン依存性キナーゼ(CDK)活性の低いM期後期からG1期にpre-Replicative Complex(pre-RC)が形成し、CDK活性がG1期後期に増加すると多数の複製タンパク質がpre-RCに集合して、複製が開始する。この集合に関して本年度は以下の点を明らかにした。
1.CDK活性に依存して形成されるpre-Landing Complex(pre-LC)を同定している。pre-LCはDNAポリメラーゼε(Polε)、GINS、Sld2、Dpb11を含む。これらのタンパク質を、酵母、バキュロウィルス発現系を用いた昆虫細胞より精製した。精製したタンパク質間の結合を調べると、4因子全てがお互いに結合することが分かった。さらに全てを混ぜ合わせると、複合体を形成することを示唆する結果を得た。
2.複製開始には、2つの複製因子Sld2とSld3がCDKによりリン酸化され、もう一つの複製因子Dpb11に結合することが必須であり、この両結合をバイパスするとCDK活性無しで複製が開始することを示した。Dpb11は、2対のBRCTドメインを持つ。タンデムに並んだ2つのBRCTドメインは、リン酸化ペプチド結合ドメインと考えられている。リン酸化されたSld2はC末側の一対のBRCTドメインに、リン酸化されたSld3はN末側の1対のBRCTドメインに結合する。我々が分離したJET1変異は、Sld3と結合するCdc45の優性変異で、Sld3のリン酸化をバイパスする。

  • Research Products

    (4 results)

All 2007 2006

All Journal Article (2 results) Book (2 results)

  • [Journal Article] CDK-dependent phophorylation of Sld2 and Sld3 initiates DNA replication in budding yeast2007

    • Author(s)
      Seiji Tanaka
    • Journal Title

      nature Vol.445 No.7125

      Pages: 328-332

  • [Journal Article] A CDK-catalysed regulatory phosphorylation for formation of the DNA replication complex Sld2-Dpb112006

    • Author(s)
      Yon-Soo Tak
    • Journal Title

      The EMBO Journal VOl.25 No.9

      Pages: 1987-1996

  • [Book] 実験医学2007

    • Author(s)
      田中 誠司
    • Total Pages
      7
    • Publisher
      羊土社
  • [Book] DNA Replication and Human Disease2006

    • Author(s)
      Walter, J.C
    • Total Pages
      16
    • Publisher
      Cold Spring Harbor Laboratory Press

URL: 

Published: 2008-05-08   Modified: 2016-04-21  

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