• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2005 Fiscal Year Annual Research Report

低分子量GTP結合蛋白質の情報伝達反応の細胞内時空間1分子解析

Research Project

Project/Area Number 15310092
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

佐甲 靖志  大阪大学, 生命機能研究科, 助教授 (20215700)

KeywordsRas / Rho / Rac / 1分子計測 / GFP / EGF / 細胞増殖 / 細胞分化
Research Abstract

RasおよびRhoファミリー低分子量GTP結合蛋白質の情報伝達反応の時間・空間的様相を、細胞内で主として1分子計測法を用いて明らかにすること、RasやRhoファミリーG蛋白質が細胞の中で、何時、何処で活性化されているか、活性化されたG蛋白質とそのエフェクターとの結合・解離のキネティクスおよび、細胞内における分子ダイナミクスなどを、我々の開発した細胞内1分子計測法等可視化解析技術を使って明らかにすることを目的とし研究を行った。G蛋白質は細胞の増殖、分化、細胞運動や細胞の形態形成において重要な役割を果たしている。
本年度は、RasとそのエフェクターであるRaf1の相互作用計測を行った。RafにはRBD(Ras binding domain),CRD(Cystein rich domain)という2つのRasGTP結合部位によって、RasGDP(不活性型)とRasGTP(活性型)を区別していると考えられていた。さらにCRDとRasGTPの結合には、Rafの構造変化を必要とすると言われている。我々はRaf1のRBD,RBD-CRD domainあるいはCRDの点突然変異体にGFPを融合させて細胞内に発現し、Rasとの相互作用時間を1分子解析した。その結果、RBD,RBD-CRDはともにRasGDPとRasGTPを見分けることができないこと、RasGTPは積極的にRafの構造変化を誘起してRafと強固に結合すること。RasGTPとRafの結合後にさらに未知の中間状態が形成されること。中間状態の形成とその後のRasGTPとRafの解離反応速度は、Rafのリン酸化によって変化することなどを示唆する結果を得た。

  • Research Products

    (6 results)

All 2006 2005

All Journal Article (5 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Formation of signal transduction complexes during immobile phase of NGFR movements.2006

    • Author(s)
      Shibata, S.C., Hibino, K., Mashimo, T., Yanagida, T., Sako, Y.
    • Journal Title

      Biochem.Biophys.Res.Comm. 342

      Pages: 316-322

    • Description
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [Journal Article] Epidermal growth factor-regulated activation of Rac GTPase enhances CD44 cleavage by metalloproteinase disintegrin ADAM102006

    • Author(s)
      Murai, T., Miyauchi, T., Yanagida.T., Sako, Y.
    • Journal Title

      Biochem.J. (in press)

  • [Journal Article] Covalent immobilization of epidermal growth factor molecule for single-molecule imaging analysis of intracellular signaling.2006

    • Author(s)
      Ichinose, J., Morimatsu, M., Yanagida, T., Sako, Y.
    • Journal Title

      Biomaterials (in press)

  • [Journal Article] 情報伝達分子の生細胞イメージング2005

    • Author(s)
      岩根敦子, 上田昌宏, 日比野佳代, 佐甲靖志, 柳田敏雄
    • Journal Title

      シグナル伝達研究2005-'06(山本雅, 仙波憲太郎編 実験医学増刊) 23

      Pages: 1976-1802

  • [Journal Article] Single-molecule analysis of epidermal growth factor signaling that leads to ultrasensitive calcium response.2005

    • Author(s)
      Uyemura, T., Takagi, H., Yanagida, T., Sako, Y.
    • Journal Title

      Biophys.J. 88

      Pages: 3720-3730

  • [Book] 細胞内蛍光1分子観察法とその応用「光科学研究の最前線」(「光科学研究の最前線」発行委員会編)2005

    • Author(s)
      佐甲靖志
    • Total Pages
      2(388-389)
    • Publisher
      強光子場科学研究懇談会

URL: 

Published: 2007-04-02   Modified: 2016-04-21  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi