2003 Fiscal Year Annual Research Report

マウス初期胚における細胞質RNAの動的変化の重要性の解明

Research Project

Project/Area Number	15370005
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
Research Institution	Tokai University
Principal Investigator	木村穣東海大学, 医学部, 教授 (10146706)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	佐藤正宏東海大学, 総合医学研究所, 助教授 (30287099) 桜井敬之東海大学, 医学部, 助手 (80317825)
Keywords	マウス / 着床前初期胚 / 受精卵 / 母性RNA / ポリA鎖伸長 / 接合子型遺伝子発現 / 翻訳制御 / cDNA Library
Research Abstract	マウス受精卵では受精後20時間頃に、卵中のRNAが蓄積母性RNAから、de novo転写による接合子型RNAに変換する。我々は、独自に単離したBri3/SSEC-D遺伝子母性RNAが受精後18時間(1細胞期後期)をピークとしてde novo転写によらず、かつ一過的にそのmRNAのポリA鎖を伸長させ、その後、短縮・分解されることを見いだし、マウス初期胚発生プログラム発動に重要な役割を持つ可能性を示唆してきた。我々は、この現象の多様性と機能解明を目指している。そのため、独自に考案した新規な方法論で、受精卵期にポリA鎖伸長を起こす母性RNA群を濃縮したcDNA Libraryの作製を試み、ついにそれに成功した(2003)。同cDNA Libraryから現在まで約300クローンの単離とその塩基配列の決定を終了した。この中で複数個得られた同一遺伝子およびESTのうち8種類について、マウス初期胚を用いて、これも独自に確立した高感度Northern Blot解析を実施した。その結果、検定した全ての遺伝子RNAがポリA鎖伸長を示すこと、その伸長様式は、本研究の契機となったBri3/SSEC-D母性RNAと同様式のグループを含め4パターンに分類できることが明らかとなった。興味深いことに、これら新規ポリA鎖伸長様式を示す母性RNAの中には、受精卵期に短時間内にポリA鎖伸長・短縮を繰り返すもの、初期2細胞期胚で劇的に分解されるものなど複数種の特徴的動的変化の存在が明らかとなり、受精卵におけるポリA鎖伸長はBri3/SSEC-D遺伝子に限らず多くの母性RNAに見られる普遍的な現象であり、かつ、その伸長様式は予想外に多様である可能性を示唆することができた。つまり、我々が完成させた新規cDNA Libraryの有効性が示されるとともに、その翻訳発動や制御機構の解析への材料を手に入れることに成功した。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Sato et al.: "Comparison of intrabursal transfer of spermatozoa (ITS), a new methods for artificial insemination in mice, with intraoviductal transfer of spermatozoa"J. Assist. Reprod, Genet. 19(11). 523-530 (2003)
[Publications] Sato et al.: "Efficient gene delivery into murine ovarian cells by intraovarian injection of plasmid DNA and subsequent in vivo electroporation"Genesis. 35. 167-174 (2003)
[Publications] Kurihara et al.: "CPEB2, A Novel Putative Translational Regulator in Mouse Haploid Germ Cells"Biology of Reproduction. 69. 261-268 (2003)
[Publications] Nomura et al.: "Hyperkeratosis and leukocytosis in transgenic mice carrying MHC classl-related gene B (MICB)"Tissue Antigen. 61. 1-8 (2003)
[Publications] Taniguchi et al.: "HOXD3 mediates the switchover of cadherin 4 to β3 integrin gene expression in human erythroleukemia HEL cells"Biomedical Research. 24(3). 133-140 (2003)
[Publications] Ohtsuka et al.: "Comparative analysis of a 229-kb medaka genomic region, containing the zic1 and zic4 genes, with Fugu, human, and mouse"Genomics. (In press). (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

マウス初期胚における細胞質RNAの動的変化の重要性の解明

Principal Investigator

木村 穣 東海大学, 医学部, 教授 (10146706)

Research Products

[Publications] Sato et al.: "Comparison of intrabursal transfer of spermatozoa (ITS), a new methods for artificial insemination in mice, with intraoviductal transfer of spermatozoa"J. Assist. Reprod, Genet. 19(11). 523-530 (2003)

[Publications] Sato et al.: "Efficient gene delivery into murine ovarian cells by intraovarian injection of plasmid DNA and subsequent in vivo electroporation"Genesis. 35. 167-174 (2003)

[Publications] Kurihara et al.: "CPEB2, A Novel Putative Translational Regulator in Mouse Haploid Germ Cells"Biology of Reproduction. 69. 261-268 (2003)

[Publications] Nomura et al.: "Hyperkeratosis and leukocytosis in transgenic mice carrying MHC classl-related gene B (MICB)"Tissue Antigen. 61. 1-8 (2003)

[Publications] Taniguchi et al.: "HOXD3 mediates the switchover of cadherin 4 to β3 integrin gene expression in human erythroleukemia HEL cells"Biomedical Research. 24(3). 133-140 (2003)

[Publications] Ohtsuka et al.: "Comparative analysis of a 229-kb medaka genomic region, containing the zic1 and zic4 genes, with Fugu, human, and mouse"Genomics. (In press). (2003)

木村穣東海大学, 医学部, 教授 (10146706)