• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2004 Fiscal Year Annual Research Report

分子間Diels-Alderaseの構造・機能解明

Research Project

Project/Area Number 15370040
Research InstitutionHOKKAIDO UNIVERSITY

Principal Investigator

田中 勲  北海道大学, 大学院・理学研究科, 教授 (70093052)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 姚 閔  北海道大学, 大学院・理学研究科, 助手 (40311518)
KeywordsDiels-Alder反応 / natural Diels-Alderase / 酵素反応機構 / 多段階反応 / 二次代謝産物 / マクロフォミン酸合成酵素 / LUMOエネルギー
Research Abstract

Diels-Alder反応はジエンおよびジエノフィルが上下から接近し,二重結合の電子軌道の重なりから協奏的にシクロヘキセン環を合成する付加反応である.本研究が行われるまでDiels-Alder反応を触媒する酵素の報告はなく,Diels-Alder反応触媒酵素が存在するかどうか,また,存在した場合にはどのようなメカニズムにより反応が進行するのかという命題に対して多分野からの興味が注がれていた.我々は平成15年度に報告したように,まずマクロフォミン酸合成酵素(MPS)の立体構造を解析した.立体構造情報から反応進行に重要だと考えられる残基に変異を施したミュータントを多種作製し,それぞれHPLCにより酵素活性を定量した.この結果,2-ピロンの2位カルボニル酸素および5位アシル酸素がそれぞれArg101グアニジル窒素,Tyr169フェノール酸素と水素結合を形成し,この水素結合がMPSの炭素・炭素結合反応において重要な働きをしていることがわかった.
Diels-Alder反応はジエンのHOMOとジエノフィルのとの相互作用で進行するが,一般にジエノフィルに導入された電子吸引基や,ジエノフィルの反応溶液中のLewis酸との相互作用,水素結合の形成はLUMOエネルギーを低下させ,Diels-Alder反応を加速することが知られている.天然に存在するDiels-Alderaseの場合では,触媒である蛋白質と基質2-ピロンとの水素結合が形成され,より反応性が加速されることが明らかになった.また,天然型Diels-AlderaseはDiels-Alder反応の直前の反応をも触媒し,Diels-Alder反応が最も起こりやすい活性化された基質を効率的な方位で活性部位にトラップし,自発的なDiels-Alder反応の進行を促進するという見解を得るに至った.

  • Research Products

    (6 results)

All 2004 2003

All Journal Article (6 results)

  • [Journal Article] Structure of macrophomate synthase2004

    • Author(s)
      Toyoyuki Ose
    • Journal Title

      Acta Cryst. D60・7

      Pages: 1187-1197

  • [Journal Article] 世界初Diels-Alderaseの構造に見る,合理的触媒戦略2004

    • Author(s)
      尾瀬農之
    • Journal Title

      生物物理 44・1

      Pages: 32-35

  • [Journal Article] 天然界のDiels-Alder反応 -Diels-Alder reaction in nature-2004

    • Author(s)
      尾瀬農之
    • Journal Title

      バイオサイエンスとインダストリー 62・1

      Pages: 37-38

  • [Journal Article] Insight into a natural Diels-Alder reaction from the structure of macrophomate synthase2003

    • Author(s)
      Toyoyuki Ose
    • Journal Title

      Nature 422・6928

      Pages: 185-189

  • [Journal Article] 天然型ディールス・アルダラーゼの結晶解析2003

    • Author(s)
      尾瀬農之
    • Journal Title

      日本結晶学会誌 45・6

      Pages: 384-390

  • [Journal Article] 世界初のDiels-Alderase2003

    • Author(s)
      尾瀬農之
    • Journal Title

      Photon Factory News 21・2

      Pages: 22-27

URL: 

Published: 2006-07-12   Modified: 2016-04-21  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi