2005 Fiscal Year Annual Research Report
脂肪細胞分化の鍵となる外的・内的因子の探索とその作用機構の解析
| Project/Area Number |
15370061
|
|---|
| Research Institution | University of Hyogo |
|---|
Principal Investigator |
大隅 隆 兵庫県立大学, 大学院・生命理学研究科, 教授 (50111787)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
廣瀬 富美子 兵庫県立大学, 大学院・生命理学研究科, 助教授 (60208882)
山口 智広 兵庫県立大学, 大学院・生命理学研究科, 助手 (50347530)
|
|---|
| Keywords | 脂肪細胞 / ペルオキシソーム / 核内レセプター / 脂肪滴 / 分化 / ノックダウン / PEX遺伝子 / 3T3-L1 |
|---|
| Research Abstract |
(1)脂肪細胞における核内レセプターERRαの役割の解析:レポーターアッセイにより、脂肪滴コートタンパク質ペリリピンと、ミトコンドリアの脱共役タンパク質UCP-1の遺伝子発現が、ERRαとPGC-1αによって協調的に活性化されることを見いだし、そのメカニズムを解析した。プロモーター領域に欠失や点変異を導入したレポーターを用いて、両遺伝子のERRα標的配列を同定した。
(2)脂肪細胞分化における核内レセプターNGFI-Bの役割:3T3-L1細胞の脂肪細胞分化誘導時に、siRNAを用いてNGFI-BのmRNAをノックダウンすると、分化がやや抑制され、同じファミリーの核内レセプターNor-1の同時ノックダウンにより、この抑制はさらに強化された。したがって、NGFI-Bファミリーは脂肪細胞分化に関与していると考えられる。NGFI-Bノックダウンによる遺伝子発現パターンの変化をマイクロアレイによって解析したところ、数種の遺伝子の発現が抑制されていた。また分化刺激初期のNGFI-Bの発現誘導には、ウシ胎児血清による遺伝子の転写促進と、細胞内cAMP濃度の上昇によるタンパク質安定化の2つの要因が寄与していることがわかった。
(3)脂肪細胞分化におけるペルオキシソームの役割:3T3-L1細胞において、siRNAにより種々のペルオキシソーム形成因子PEXをノックダウンしたところ、PEX16または19のノックダウンにより、脂肪細胞分化能が顕著に抑制された。一方、PEX3、5、または14のノックダウンでは、脂肪細胞への分化能は変化しなかった。PEX16ノックダウン細胞では、脂肪細胞分化の主たる制御因子であるPPARγおよびC/EBPαの発現が顕著に低下していた。この結果から、PEX16と19は互いに協調することにより、脂肪細胞分化において重要な役割を果たしていると考えられる。
|
