2003 Fiscal Year Annual Research Report
内分泌かく乱物質の体内動態、特にステロイド代謝と硫酸化との関係解明
| Project/Area Number |
15380075
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
|
| Research Institution | University of Miyazaki |
|---|
Principal Investigator |
水光 正仁 宮崎大学, 農学部, 教授 (00128357)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
榊原 陽一 宮崎大学, 農学部, 助手 (90295197)
|
|---|
| Keywords | 硫酸転移酵素 / 環境ホルモン / 薬物代謝 / 硫酸化 / 内分泌かく乱物質 / エストロゲン / 硫酸抱合 / ビスフェノールA |
|---|
| Research Abstract |
代表的な内分泌撹乱物質の1つであるビスフェノールA(BPA)の塩素や臭素の置換体が古紙再生紙工場等から近年同定され、これらは環境中において生成されることが推測されている。そしてそのエストロゲン様作用は、置換体の方がBPAよりも強いことが報告されている。ヒト体内のエストロゲン濃度は、エストロゲン硫酸転移酵素(hSULT1E1)によって調節されている。我々は内分泌撹乱作用の一部がこの硫酸転移酵素の阻害によると提案してきた。そこで本研究では、ヒトSULT1E1に対するBPA塩素及び臭素置換体の阻害作用の検討を行った。
リコンビナントhSULT1E1はGSTとの融合タンパク質として、大腸菌を用いた発現系を構築し、グルタチオンセファロースによるアフィニティーカラムクロマトグラフィーにより精製された。この精製リコンビナントhSULT1E1を用い、Estronおよび17β-Estradiolを基質として阻害実験を行った。
その結果、BPA及び塩素・臭素置換体のいずれも硫酸化を受けることが明らかになった。また、Cl-BPAとBr-BPAはBPAよりも強い阻害を示し、また塩素と臭素の置換数は少ない方が強く阻害した。阻害形式は競争阻害であることが明らかとなり、酵素のエストロゲン結合部位に対して作用することが考えられた。これらの結果はこれまでの報告と一貫性があり、内分泌撹乱作用の一部はエストロゲン硫酸転移酵素の作用阻害によるものであることを示唆している。
|
-
[Publications] Pai, T.G.: "Structure-function relationships in the stereospecific and manganese-dependent Dopa/Tyrosine-sulfating activity of human monoamine-form, phenol sulfotransferase, SULT1A3"Journal of Biological Chemistry. 278・3. 1525-1532 (2003)
-
[Publications] Sugahara Takuya: "Differential roles of human monoamine (M)-form and simplephenol (P)-form phenol sulfotransferases in drug metabolism"Journal of Biochemistry. 133・2. 259-262 (2003)
-
[Publications] Nobe Rika: "Purification and Characterization of Laminaran Hydrolases from Trichoderma viride"Bioscience Biotechnology and Biochemistry. 67・2. 1349-1357 (2003)
-
[Publications] Sugahara Takuya: "Sulfation of hydroxychlorobiphenyls : Molecular cloning, expression, and functional characterization of zebrafish SULT1 sulfotransferases"European Journal of Biochemistry. 270・11. 2404-2411 (2003)
-
[Publications] Ohkimoto, Kei: "Sulfonation of environmental estrogens by zebrafish cytosolic sulfotransferases"Biochemistry Biophysics Research Communication. 309・1. 7-11 (2003)
-
[Publications] Ohkimoto, Kei: "Characterization of a putative Zebrafish estrogen sulfotransferase : Inhibitory effects and mechanism of action of phytoestrogens"Chemico-Biological Interaction. 147・1. 1-7 (2004)
-
[Publications] 境田博至: "蕎麦焼酎の特徴香及び穀類本格焼酎の揮発性成分分析について"日本食品科学工学会誌. 50・12. 555-562 (2003)
-
[Publications] 榊原陽一: "硫酸転移酵素を用いた変異原試験法における食品の機能性評価に関する研究"New Food Industry. 45・10. 60-64 (2003)
-
[Publications] 榊原陽一: "翻訳後修飾としてのチロシン硫酸化と機能解明-Tyrosylprotein Sulfotransferaseの生化学的諸性質の検討-"日本農芸化学会誌. 78・1. 34-36 (2004)
